[發明專利]利拉魯肽衍生物及其制備方法

在審

• 申請號: 202010066293.9
• 申請日: 2020-01-20
• 公開（公告）號: CN113135990A
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發明（設計）人: 查若鵬;劉慧玲;唐亞連;陳衛;楊接運
• 申請（專利權）人: 寧波鯤鵬生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K19/00;C07K1/06;C07K1/20
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 肖艷;徐迅

1.一種Boc修飾的利拉魯肽主鏈，其特征在于，所述的Boc修飾的利拉魯肽主鏈的第20位為保護賴氨酸，并且，所述的保護賴氨酸為Nε-(叔丁氧羰基)-賴氨酸。

2.如權利要求1所述的利拉魯肽主鏈，其特征在于，所述的利拉魯肽主鏈的N端被Fmoc修飾。

3.一種利拉魯肽主鏈融合蛋白，其特征在于，所述的利拉魯肽融合蛋白從N端到C端具有式I所示的結構：

FP-TEV-EK-GLP-1 (I)

式中，

“-”代表肽鍵；

FP為綠色熒光蛋白折疊單元；

TEV為第一酶切位點，較佳地為TEV酶酶切位點(如序列ENLYFQG所示，SEQ ID NO.:8)；

EK為第二酶切位點，較佳地為腸激酶酶切位點(如序列DDDDK所示，SEQ ID NO.:9)；

GLP-1代表權利要求1所述的Boc修飾的利拉魯肽。

4.如權利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述的綠色熒光蛋白折疊單元為u2-u3、u4-u5或u4-u5-u6，其中，

	氨基酸序列
u2	HKFSVRGEGEGDAT(SEQ ID NO.:12)
u3	KLTLKFICTT(SEQ ID NO.:13)
u4	YVQERTISFKD(SEQ ID NO.:14)
u5	TYKTRAEVKFEGD(SEQ ID NO.:15)
u6	TLVNRIELKGIDF(SEQ ID NO.:16)。

5.如權利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述的利拉魯肽主鏈融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.:1、3、4所示。

6.一種制備利拉魯肽的方法，所述方法包括步驟：

(i)提供一Boc修飾的利拉魯肽主鏈；

(ii)對所述的Boc修飾的利拉魯肽主鏈進行Fmoc修飾，從而制得Fmoc和Boc修飾的利拉魯肽主鏈；

(iii)對所述的Fmoc和Boc修飾的利拉魯肽主鏈進行脫Boc處理，并將其與利拉魯肽側鏈進行反應，從而制得Fmoc修飾的利拉魯肽；和

(iv)對所述的Fmoc修飾的利拉魯肽進行脫Fmoc與側鏈脫tBu處理，從而制得利拉魯肽。