[發明專利]乙醇非氧化代謝物乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸乙酯的制備方法

在審

• 申請號: 202010065988.5
• 申請日: 2020-01-20
• 公開（公告）號: CN111187313A
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 贠克明;路玉平;尉志文;張潮;馬紅娟;王穎;黃博;王樂樂;王銳利
• 申請（專利權）人: 山西醫科大學
• 主分類號: C07H15/04
• 分類號: C07H15/04;C07H1/00;C07C303/24;C07C303/44;C07C305/06
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

本發明涉及乙醇非氧化代謝物乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸乙酯的制備方法，屬于化合物制備領域。本發明采用葡萄糖醛酸內酯為基本的反應原料，經過三乙酰基溴葡萄糖醛酸甲酯中間體，在超聲、水浴加熱等條件下反應即可得到乙醇非氧化代謝物乙基葡萄糖醛酸苷，使該制備方法具有環境因素要求低，操作簡單、易于實現的優點；另外本發明以無水乙醇和硫酸為原料，經過加熱、過濾、沉淀、水浴揮干等操作得到乙醇非氧化代謝物硫酸乙酯，具有原料來源廣泛、環境因素要求低，操作簡單、易于實現的優點。

技術領域

本發明屬于化合物制備領域領域，具體涉及乙醇非氧化代謝物乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸乙酯的制備方法。

背景技術

乙醇，俗稱酒精，是世界性的一大濫用物質。司法鑒定實踐中，在交通事故、懷疑中毒的自殺、他殺案件，尤其是涉及死亡的案件中，需要對血液中的酒精的濃度(BloodAlcohol Concentration,BAC)進行分析和闡述，其檢測結果往往是判定當事人責任的關鍵性證據。研究顯示，乙醇入體后，會生成4類非氧化代謝物，包括乙基葡萄糖醛酸酯(EtG)、乙基硫酸酯(EtS)、脂肪酸乙酯(FAEE)和磷脂酰乙醇(PEth)，它們具有極高的專屬性和特異性，被認為是乙醇攝入的重要生物標志物。而通過檢測全血中乙醇的這些非氧化代謝物將有望解決上述兩個難題(酒后逃逸案件BAC的檢測和尸體血液中乙醇的來源問題)。

由于乙醇的4類非氧化代謝物的理化性質差別大，目前已有報道的分析方法，僅僅針對于一類或兩類代謝物的檢測。事實上，乙醇的4類非氧化代謝物具有不同的檢測時限，且在尸體檢材中的穩定性也有所差異，如EtG和EtS是目前受到關注最多的兩類代謝物，它們在血液中的檢測時限大于18h，其作為酒精標志物具有很高的靈敏度和專屬性；FAEE具有細胞毒性，檢測時限長達24h，研究認為酒精中毒及酒精引起的相關疾病均與其含量及毒性密切相關；PEth為乙醇存在情況下細胞膜合成時產生的特異性物質，飲酒后一周仍可檢測到PEth，且對于長期飲酒者其檢測時限更長，并且，根據其含量可對單次飲酒與長期飲酒進行區分。

本發明采用化學合成的方法對乙醇的兩種非氧化代謝物——乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸乙酯進行合成。通過該方法合成的兩種物質產率與純度較低，通過方法優化提高了硫酸乙酯的純度和產率，但缺乏兩種物質的提純方法。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的之一在于提供乙醇非氧化代謝物乙基葡萄糖醛酸苷的制備方法；本發明的目的之二在于提供乙醇非氧化代謝物硫酸乙酯的制備方法。

為達到上述目的，本發明提供如下技術方案：

1、乙醇非氧化代謝物乙基葡萄糖醛酸苷的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

(1)合成BGAME原料：按照15～18:150～250:0.2～0.5，g:ml:g的質量體積比將葡萄糖醛酸內酯、甲醇和甲醇鈉混合，超聲至完全溶解后靜置，40℃下水浴加熱至溶劑完全揮發，加入乙酸酐使其溶解，再加入含高氯酸的乙酸酐溶液，室溫下過夜，加入0.1ml高氯酸，混合均勻后在-20℃冰箱中過夜，析出晶體，過濾后用乙醚洗滌后即可得到BGAME原料；

(2)合成BGAME：將步驟(1)中制備得到的BGAME原料和溴化氫乙酸混合，-20℃冰箱中過夜，40℃下水浴加熱至溶劑完全揮發，加入氯仿，用體積比為1:1的冷飽和碳酸氫鈉溶液和純水混合溶劑進行萃取，靜置后收集下層溶液，加入無水硫酸鈉干燥后過濾，在40℃下水浴加熱揮干溶劑得到殘余物，加入乙醇溶解后過濾，濾去不溶物后再去除乙醇即可得到BGAME；

(3)合成乙基葡萄糖醛酸苷：將步驟(2)中制備得到的BGAME與苯、無水乙醇混合，加熱至沸騰后再加入碳酸銀，攪拌，室溫過夜；離心后收集溴化物沉淀，40℃揮干，再加入無水甲醇和甲醇鈉，攪拌，室溫過夜，水浴揮干；再加入氫氧化鋇溶液，超聲并緩慢滴加質量分數為7～10％的草酸溶液至PH＝6，離心后40℃揮干，再滴加甲醇至完全溶解，滴加乙醚，形成白色沉淀即為乙基葡萄糖醛酸苷。