[發明專利]一種特異性人免疫球蛋白病毒滅活工藝

在審

• 申請號: 202010065492.8
• 申請日: 2020-01-20
• 公開（公告）號: CN111110876A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 肖嵐;劉余江;滕世超;張寶獻;肖煉峰;黃詩琴;龔行
• 申請（專利權）人: 華蘭生物工程重慶有限公司
• 主分類號: A61L2/02
• 分類號: A61L2/02;A61L2/04
• 代理公司: 重慶信航知識產權代理有限公司 50218
• 代理人: 李磊

本發明公開了一種特異性人免疫球蛋白病毒滅活工藝，包括以下步驟：S1?二次沉淀溶解、過濾；S2?首次超濾配制；S3?孵放前配制；S4?低pH孵放；S5?二次超濾配制；目前特異性免疫球蛋白主要采用一步病毒滅活工藝，而國家對血液制品的病毒滅活工藝要求越來越嚴格，血液制品的生產工藝必須包含兩步以上的滅活工藝，本發明在特異性免疫球蛋白原生產工藝上添加一步病毒滅活工藝，即在原來的巴氏滅活基礎上添加一步低pH孵放，彌補了單一巴氏滅活的缺陷；同時孵放過程對效價影響低，收率高。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，尤其涉及一種特異性人免疫球蛋白病毒滅活工藝。

背景技術

特異性人免疫球蛋白是用具有高效價的特異性抗體血漿為原料制備的免疫球蛋白制劑，具體的過程是對健康獻血漿員進行免疫注射(即注射疫苗使獻血漿員產生抗體)，用單采血漿技術獲得含有特異性抗體的血漿，經低溫乙醇分離法制備并經病毒滅活處理，最后得到特異性免疫球蛋白。

病毒滅活是保證免疫球蛋白制品安全的關鍵步驟，世界衛生組織(WHO)不斷關注血漿制品的安全性，出臺了一系列有關支持和建議要求。特異性人免疫球蛋白應有特定的去除或者滅活病毒方法，目前病毒滅活的方法有巴氏滅活法、干熱法、有機溶劑/去污劑(S/D)處理法、膜過濾法、低pH孵放法等，特異性人免疫球蛋白采用以上病毒滅活方法，均存在缺陷，例如S/D和低pH孵放方法無法滅活非脂包膜病毒，干熱法僅適用于凍干制品，而且會破壞人免疫球蛋白的天然結構，巴氏滅活法使人免疫球蛋白的天然結構發生改變，產生聚合物，膜過濾法由于蛋白質溶液分子量大，過濾困難，難以實現規模化操作，由于單一病毒滅活存在的缺陷，國家對血液制品的病毒滅活要求越來越嚴格，血液制品的生產工藝必須包含兩步以上的滅活工藝，而目前特異性人免疫球蛋白采用的是一步病毒滅活工藝，無法滿足國家對血液制品的安全性要求。

發明內容

本發明的目的在于提供一種特異性人免疫球蛋白病毒滅活工藝，在特異性免疫球蛋白原生產工藝的基礎上添加一步病毒滅活工藝，即在原來的巴氏滅活基礎上添加一步低PH孵放，提高了產品的安全性，滿足國家對特異性免疫球蛋白的兩步滅活要求。

為了實現上述目的，本發明提供了以下兩種不同配方的技術方案：

方案一：

一種特異性人免疫球蛋白病毒滅活工藝，包括以下步驟：

S1-二次沉淀溶解、過濾：接取用低溫乙醇法生產的二次沉淀，用二次沉淀量體積5-10倍的2-8℃注射用水溶解二次沉淀，然后對二次沉淀溶解液進行過濾，得到二次沉淀過濾液；

S2-首次超濾配制：用孔徑為50KD的超濾膜包等體積透析8倍注射用水，透析結束后濃縮蛋白濃度不低于80g/L，得到首次超濾制品；

S3-孵放前配制：在首次超濾制品中加入麥芽糖、吐溫-80和注射用水，使制品的蛋白濃度為45～55g/、麥芽糖濃度為80～120g/L、吐溫-80的濃度為40～80mg/L，并且用酸堿溶液調整PH至4.20～4.30，得到配制后的制品；

S4-低pH孵放：配制后的制品用濾芯除菌過濾至大立瓶中，放于23～25℃環境下不少于24天；

S5-二次超濾配制：孵放后制品再次用8倍注射用水超濾透析。

方案二：

一種特異性人免疫球蛋白病毒滅活工藝，包括以下步驟：

S1-二次沉淀溶解、過濾：接取用低溫乙醇法生產的二次沉淀，用二次沉淀量體積5-10倍的2-8℃注射用水溶解二次沉淀，然后對二次沉淀溶解液進行過濾，得到二次沉淀過濾液；

S2-首次超濾配制：用孔徑為50KD的超濾膜包等體積透析8倍注射用水，透析結束后濃縮蛋白濃度不低于80g/L，得到首次超濾制品；