[發明專利]血清載脂蛋白A-II的分離純化方法有效
| 申請號： | 202010063680.7 | 申請日： | 2020-01-20 |
| 公開（公告）號： | CN111153985B | 公開（公告）日： | 2023-06-13 |
| 發明（設計）人： | 夏杰;王劍;王民燕;普筱薇;葉浩威 | 申請（專利權）人： | 寧波賽珀生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/775 | 分類號： | C07K14/775;C07K1/20 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人： | 王學芝 |
| 地址： | 315033 浙江省*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 血清 脂蛋白 ii 分離 純化 方法 | ||
1.血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，包括有以下步驟：
1)利用疏水層析填料對血清中的載脂蛋白A-II成分進行初步提純，用不含鹽的緩沖液洗雜，用含有有機醇的緩沖液洗脫并收集含A-II載脂蛋白的洗脫液；
2)利用陰離子交換層析填料對步驟1)中收集的含A-II載脂蛋白的洗脫液進行精細提純，用含有去污劑和有機醇的緩沖液對載脂蛋白A-II進行柱上脫脂。
2.根據權利要求1所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述步驟1)中，疏水層析填料為Phenyl?Sepharose?High?Performance。
3.根據權利要求1所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述步驟1)中，疏水層析初步提純的過程包括平衡、上樣、洗雜、洗脫。
4.根據權利要求1所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述步驟1)中，不含鹽的緩沖液為pH?7.4的20mM?Tris-HCl緩沖液。
5.根據權利要求1所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述步驟1)中，含有有機醇的緩沖液為30—50％的pH?7.4的20mM?Tris-HCl緩沖液。
6.根據權利要求1所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述步驟2)中，陰離子交換層析填料為Q?Sephrose?HP。
7.根據權利要求1所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述步驟2)中，利用陰離子交換層析填料對步驟1)中收集的含A-II載脂蛋白的洗脫液進行精細提純過程包括平衡、上樣、脫脂、再平衡、洗脫。
8.根據權利要求1所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述步驟2)中，含有去污劑和有機醇的緩沖液為含有0.5％的去污劑，30—50％的有機醇的pH?7.4的20mM?Tris-HCl緩沖液。
9.根據權利要求8所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述去污劑為曲拉通X-100和聚多卡醇。
10.如權利要求8中所述的血清載脂蛋白A-II的分離純化方法，其特征在于：所述有機醇為乙二醇。
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