[發明專利]一種用于構建幼畜心肌炎細胞模型的細胞系及構建方法在審
| 申請號： | 202010061679.0 | 申請日： | 2020-01-19 |
| 公開（公告）號： | CN111187751A | 公開（公告）日： | 2020-05-22 |
| 發明（設計）人： | 王光祥;王艷華;張志東;李彥敏;楊能能 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院蘭州獸醫研究所 |
| 主分類號： | C12N5/077 | 分類號： | C12N5/077;C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 崔自京 |
| 地址： | 730046 甘肅*** | 國省代碼： | 甘肅;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 構建 幼畜 心肌炎 細胞 模型 細胞系 方法 | ||
1.一種豚鼠心肌細胞系，其特征在于，所述細胞系為豚鼠心肌細胞系，保藏在中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：C201932。
2.如權利要求1所述的豚鼠心肌細胞系在構建幼畜心肌炎細胞模型中的應用。
3.如權利要求2所述的豚鼠心肌細胞系在構建幼畜心肌炎細胞模型中的應用，其特征在于，包括如下步驟：
(1)向權利要求1所述細胞系中接種口蹄疫病毒，25cm2/瓶接種口蹄疫病毒液1毫升，吸附10～30分鐘后加心肌細胞培養基CMM 10mL，調pH至7.0～7.2，之后加入加青霉素、鏈霉素各100IU/ml，于37℃、5％CO2濃度培養箱中進行培養；
(2)經步驟(1)培養至細胞病變達到75％以上時，置-20℃反復凍融兩次，待無菌檢驗、支原體檢驗、外源病毒檢驗合格后，幼畜心肌炎細胞模型構建完成。
4.如權利要求2所述的豚鼠心肌細胞系在構建幼畜心肌炎細胞模型中的應用，其特征在于，步驟(1)所述口蹄疫病毒為O型口蹄疫病毒、A型口蹄疫病毒或AsiaI型口蹄疫病毒。
5.如權利要求2所述的豚鼠心肌細胞系在構建幼畜心肌炎細胞模型中的應用，其特征在于，步驟(2)所述所述幼畜心肌炎模型的病毒TCID50≥6.00。
6.如權利要求2所述的豚鼠心肌細胞系在構建幼畜心肌炎細胞模型中的應用，其特征在于，所述幼畜心肌炎細胞模型中的肌鈣蛋白I、肌紅蛋白濃度為與未接種細胞系中濃度相比均達到2倍以上。
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