[發明專利]一種美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法

有效

• 申請號: 202010060512.2
• 申請日: 2020-01-19
• 公開（公告）號: CN111208230B
• 公開（公告）日: 2022-02-25
• 發明（設計）人: 王躍飛;呂偉奇;柴欣;薛根;王子延;牛璐;劉香月;楊靜
• 申請（專利權）人: 天津中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 張沙沙

1.一種美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述代謝產物包括5-羥基吲哚啉-2-酮、6-羥基-3,4-二氫-1H-2-喹啉酮、8-羥基-2-喹啉酮、羥吲哚、8-羥基-3,4-二氫-2-喹啉酮、8-羥基-2-喹啉酸；所述檢測方法為超高效液相色譜法，色譜條件為：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；

流動相A為0.08～0.12％(v/v)甲酸水溶液，流動相B為乙腈，梯度洗脫程序為：0～5min，流動相A 98％～93％；5～9min，流動相A 93％～90％；9～19min，流動相A 90％～78％；19～20min，流動相A 78％～98％；

流速0.3～0.35mL/min；

柱溫40～60℃；

檢測波長252～256nm。

2.根據權利要求1所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述流動相A為0.10％(v/v)甲酸水溶液。

3.根據權利要求1所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述流速為0.3mL/min；和/或

所述柱溫為50℃；和/或

所述檢測波長為254nm。

4.根據權利要求1～3任一項所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括以下操作：

以甲醇水溶液為溶劑，配制所述代謝產物的混合對照品溶液；在所述色譜條件下，用超高效液相色譜法對所述混合對照品溶液進行檢測，根據所得峰面積建立各所述代謝產物的濃度–峰面積線性回歸方程；

以甲醇水溶液為溶劑，將美洲大蠊糞便制成供試品溶液；在所述色譜條件下，用所述超高效液相色譜法對所述供試品溶液進行檢測，將得到的峰面積代入所述濃度–峰面積線性回歸方程，計算所述供試品溶液中所述代謝產物的含量。

5.根據權利要求4所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，配制所述混合對照品溶液的所述甲醇水溶液中甲醇的體積百分濃度為30～70％。

6.根據權利要求5所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述甲醇水溶液中含有0～1％(v/v)甲酸。

7.根據權利要求4所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述供試品溶液的配制方法為：將所述美洲大蠊糞便粉碎，置于相當于所述美洲大蠊糞便重量20～100倍的50～70％(v/v)甲醇水溶液中，超聲處理30～50min，過濾，濾液用水稀釋至2～3倍。

8.根據權利要求7所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述甲醇水溶液中含有0～1％(v/v)甲酸；和/或

所述水中含有0～1％(v/v)甲酸。

9.根據權利要求7所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述超聲的功率為540W，頻率為35kHz。

10.根據權利要求7所述的美洲大蠊腸道菌群代謝產物的檢測方法，其特征在于，所述配制方法還包括在超聲處理前用14000rpm離心10min，取上清液。