[發明專利]一種檢測蘋果汁中展青霉素的方法

有效

• 申請號: 202010059656.6
• 申請日: 2020-01-19
• 公開（公告）號: CN111289637B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 李先江;張慶合;李紅梅
• 申請（專利權）人: 中國計量科學研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

1.一種檢測蘋果汁中展青霉素的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

將待測蘋果汁與展青霉素同位素內標混勻，之后進行固液分離，得到含內標的澄清蘋果汁；

利用季胺類高分子固相萃取柱對所述含內標的澄清蘋果汁進行前處理，得到待測樣品；配制含有所述展青霉素同位素內標的不同濃度的展青霉素標準工作液；包括：HyperSepRetain AX固相萃取柱先后加入3 mL甲醇和3 mL水進行活化，再加入2 mL含內標的澄清蘋果汁，在重力作用下自然流出，之后依次用3 mL 0.1%體積分數的乙酸水溶液和純水淋洗固相萃取柱，然后用真空泵將固相萃取柱抽干，最后用1 mL甲醇洗脫展青霉素，收集洗脫液氮氣吹干后，用5%乙腈水溶液復溶，制成待測樣品，用于后期的液質聯用分析；

對所述待測樣品以及不同濃度的所述展青霉素標準工作液進行UPLC-ID-MS/MS檢測，其中，液相色譜的檢測條件包括：色譜柱的種類為C₁₈，流動相中A相為水，B相為乙腈，流速為0.2-0.4 mL/min；所述A相與所述B相的體積比為95:5的等度洗脫；質譜采用電噴霧離子源負離子模式，所述質譜的檢測條件包括：毛細管電壓-2.5±0.25 KV，錐孔電壓為10±1 V，源偏移電壓30±3 V，源溫度150±15℃；脫溶劑溫度400±40℃，錐孔氣流150±15 L/h，解吸附氣流800±80 L/h，碰撞氣流速為0.05±0.005 mL/min，碰撞能量為8±0.8，得到所述待測樣品以及不同濃度的所述展青霉素標準工作液對應的質譜圖；

根據不同濃度的所述展青霉素標準工作液對應的質譜圖峰面積制作標準曲線；

根據所述標準曲線以及所述待測樣品對應的質譜圖峰面積，計算所述待測樣品中展青霉素的含量，從而得到所述待測蘋果汁中展青霉素的含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜柱為BEH C₁₈；液相色譜的檢測條件還包括：所述色譜柱的溫度為30-40℃。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，超高效液相色譜儀的樣品室溫度為4-10℃。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，質譜儀為三重四極桿質譜儀；所述三重四極桿質譜儀的m/z 153m/z 109通道為檢測展青霉素的定量離子對，m/z 153m/z 81為檢測展青霉素的定性離子對；m/z 160m/z 115為檢測所述展青霉素同位素內標的定量離子對，而m/z 160m/z 86為檢測所述展青霉素同位素內標的定性離子對。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述標準曲線的線性范圍為1-400 ng/mL，檢出限為0.2 ng/mL。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述展青霉素同位素內標為¹³C-展青霉素或氘代展青霉素。