[發(fā)明專利]一種提高兩性霉素B產(chǎn)量的補(bǔ)料控制發(fā)酵方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010059607.2
• 申請日: 2020-01-19
• 公開（公告）號(hào): CN111118090B
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柳志強(qiáng);張博;張雨函;陳燏;陳開;鄭裕國
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P19/62
• 分類號(hào): C12P19/62;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 浙江千克知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33246
• 代理人: 冷紅梅

1.一種提高兩性霉素B產(chǎn)量的補(bǔ)料控制發(fā)酵方法，所述方法包括：將結(jié)節(jié)鏈霉菌CCTCCNO：M 2017426接種至種子培養(yǎng)基，獲得種子液；種子液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵總時(shí)間120±36小時(shí)，所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成如下：葡萄糖60~80 g/L，棉籽粉10~30 g/L，碳酸鈣5~15 g/L，磷酸二氫鉀0.05~5 g/L，溶劑為水，自然pH值；發(fā)酵過程中參數(shù)控制如下：

（1）控制發(fā)酵體系pH維持在6.0~7.5，直至發(fā)酵結(jié)束；

（2）在發(fā)酵培養(yǎng)第0~48h，維持溫度在30±3℃，當(dāng)發(fā)酵至48h時(shí)，將溫度降至26±3℃，維持該溫度直至發(fā)酵結(jié)束；

（3）發(fā)酵前期使菌體在自然DO條件下生長，當(dāng)發(fā)酵體系DO值下降至5~50%時(shí)，控制DO值維持在5%~50%至108h，后恢復(fù)自然DO值直至發(fā)酵結(jié)束；

（4）控制發(fā)酵培養(yǎng)基中葡萄糖濃度，發(fā)酵過程中葡糖糖濃度下降到20~40 g/L時(shí)，進(jìn)行恒速補(bǔ)料，葡糖糖補(bǔ)料速率為0.1~5.0 g/L·h；

（5）在發(fā)酵第24h，補(bǔ)加5~15 mL/L丙酮酸、0.001~0.1 g/L煙酰胺、0.1~5 mmol/L丙氨酸和0.1~15 mg/L異丙醇四種混合外源添加物。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述種子培養(yǎng)基組成如下：蛋白胨10~30 g/L，酵母提取物5~20 g/L，氯化鈉1~10 g/L，葡萄糖5~20 g/L，碳酸鈣0.5~2 g/L，溶劑為水，pH為7.0~7.2。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于發(fā)酵過程中以質(zhì)量濃度為30±2%的氨水或乙酸來控制pH值。