[發明專利]基于葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺制備葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體的方法

有效

• 申請號: 202010058923.8
• 申請日: 2020-01-19
• 公開（公告）號: CN111135306B
• 公開（公告）日: 2023-03-10
• 發明（設計）人: 石云峰;王軍杰;張憲碩;雷改英;李婷
• 申請（專利權）人: 安陽師范學院
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K47/34;A61K47/22;A61K47/10;A61K41/00;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 付艷麗

本發明屬于基因載體基礎材料的合成技術領域，具體涉及一種基于葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺制備葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體的方法。利用葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺四氧化三鐵納米晶體以構筑葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體，能夠賦予非病毒基因載體以葉酸和磁性雙重靶向特性，從而實現載體對腫瘤等的主動靶向和磁靶向，可以用于基因治療、磁熱療等領域。

技術領域

本發明屬于基因載體基礎材料的合成技術領域，具體涉及一種基于葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺制備葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體的方法。

背景技術

超支化聚胺具有三維準球形結構和大量的胺基，是一類非常優異的非病毒基因載體。同時，它還是一類理想的納米反應器，可用來合成量子點、金屬納米晶體和磁性氧化物納米晶體。利用超支化聚胺原位制備磁性氧化鐵納米晶體，可得到一類磁性的非病毒基因載體。

經對現有技術的文獻檢索發現，目前利用超支化聚胺原位制備磁性非病毒基因載體已有一定的報道[Shi, Y.F.; Zhou, L.Z.; Wang, R.B.; Pang, Y.; Xiao, W.C.; Li,H.Q.; Su, Y.; Wang, X.L.; Zhu, B.S.; Zhu, X.Y.; Yan, D.Y. and Gu, H.C.Nanotechnology2010, 21, 115103.; Shi, Y.F.; Du, J. M.; Zhou, L. Z.; Li, X.T.; Zhou, Y. H.; Li, L. L.; Zhu, X. Y. J. Mater. Chem.2012, 22, 355-360.;Mykhaylyk, O.; Antequera, Y.S.; Vlaskou, D.; Plank, C. Nat. Protoc.2007, 2,2391-2411.] 在這些報道中，人們利用超支化聚乙烯亞胺及其超分子組裝體制備原位制備磁性非病毒基因載體，但是目前尚未有利用葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺原位制備葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體的報道。利用葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺原位葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體，能夠賦予非病毒基因載體以葉酸和磁性雙重靶向特性，從而實現載體對腫瘤等的主動靶向和磁靶向，利于基因治療。

發明內容

本發明的目的是提供一種基于葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺制備葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體的方法。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：

一種基于葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺制備葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體的方法，包括以下步驟：

（1）將葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺溶解于水中，并通氬氣除氧，得到葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺水溶液；

（2）氬氣保護下，向步驟（1）得到的水溶液中加入七水硫酸亞鐵的無氧水溶液，磁力攪拌1-6h，得到Fe(OH)₂/葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺復合物水溶液；

（3）將步驟（2）所得的產物于90-130℃下微波加熱0.5-2h，即可得到Fe₃O₄/葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺復合物；

（4）將步驟（3）所得的產物在2-8℃條件下透析3-5d，抽濾除去沉淀，冷凍干燥，即可得到所述葉酸和磁性雙靶向型非病毒基因載體。

優選的，步驟（1）中所述葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚胺為葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚乙烯亞胺、葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚酰胺-胺或葉酸靶向聚乙二醇修飾型超支化聚丙烯亞胺。