[發(fā)明專利]一種一鍋法制備用于檢測(cè)β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010057735.3
• 申請(qǐng)日: 2020-01-19
• 公開（公告）號(hào): CN111171091B
• 公開（公告）日: 2021-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鮑彥;吳義進(jìn);劉真真;王忠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 合肥華納生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): C07H15/26
• 分類號(hào): C07H15/26;C07H1/00;C12Q1/34
• 代理公司: 北京集智東方知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11578
• 代理人: 吳倩

1.一種一鍋法制備用于檢測(cè)β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物的方法，其特征在于，以式（I）結(jié)構(gòu)化合物和乙酰溴-α-D-葡萄糖醛酸甲酯為原料，在極性溶劑、偶聯(lián)試劑存在的條件下反應(yīng)一段時(shí)間后加入堿性試劑，繼續(xù)反應(yīng)一定時(shí)間后加入酸性試劑調(diào)節(jié)pH至酸性，經(jīng)后處理制得式（II）結(jié)構(gòu)化合物，即所述用于檢測(cè)β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物；

；

式（I）、（II）中R₁、R₂分別獨(dú)立地選自H、鹵素、CN、C₁-C₆烷基、鹵代C₁-C₆烷基、C₂-C₆烯基、鹵代C₂-C₆烯基、C₁-C₆烷氧基、鹵代C₁-C₆烷氧基、C₃-C₆環(huán)烷基；

所述極性溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺和N,N-二甲基乙酰胺中的任一種；

所述偶聯(lián)試劑為氧化銀或碳酸銀；

在極性溶劑、偶聯(lián)試劑存在的條件下的反應(yīng)溫度為25-40℃；

所述堿性試劑為NaOH或KOH；所述酸性試劑為鹽酸或硫酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，具體步驟如下：

S1：將式（I）結(jié)構(gòu)化合物和乙酰溴-α-D-葡萄糖醛酸甲酯加入反應(yīng)瓶?jī)?nèi)，加入極性溶劑、偶聯(lián)試劑，反應(yīng)8-24h；

S2：攪拌條件下加入堿性試劑，控制反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)4-8h后加入酸性試劑，調(diào)pH至2-3，后旋蒸掉極性溶劑并經(jīng)反相純化得到式（II）結(jié)構(gòu)化合物即產(chǎn)物β-D-葡萄糖醛酸。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，式（I）、（II）中R₁、R₂分別獨(dú)立地選自H、鹵素、CN、C₁-C₆烷基、鹵代C₁-C₆烷基、C₂-C₆烯基、C₁-C₆烷氧基。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，式（I）、（II）中R₁、R₂分別獨(dú)立地選自H、C₁-C₆烷基。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，式（I）、（II）中R₁、R₂分別獨(dú)立地選自H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，式（I）、（II）中R₁、R₂分別獨(dú)立地選自H、甲基、異丙基。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，式（I）、（II）中R₁、R₂同時(shí)為H，或者R₁為甲基、R₂為異丙基。

8.根據(jù)權(quán)利要求1或2任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，式（I）結(jié)構(gòu)化合物與乙酰溴-α-D-葡萄糖醛酸甲酯的摩爾比為1:1-1:1.5；式（I）結(jié)構(gòu)化合物與偶聯(lián)試劑的摩爾比為1:1-1:1.5。

9.根據(jù)權(quán)利要求1或2任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，式（I）結(jié)構(gòu)化合物與堿性試劑的摩爾比為1:1-1:1.5。