[發(fā)明專利]一種含干細(xì)胞外泌體的凍干貼及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010056135.5
• 申請(qǐng)日: 2020-01-18
• 公開（公告）號(hào): CN111249211A
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴博;田麗軍;劉瑩;何婷婷;李敏;劉煒琳;聶蘇秦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西安九州再生醫(yī)學(xué)集團(tuán)有限公司
• 主分類號(hào): A61K8/98
• 分類號(hào): A61K8/98;A61K8/99;A61K8/02;A61Q19/08;A61Q19/00;A61Q19/02
• 代理公司: 北京匯信合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11335
• 代理人: 吳甘棠

本發(fā)明公開了一種含干細(xì)胞外泌體的凍干貼及其制備方法和應(yīng)用，屬于細(xì)胞生物工程技術(shù)及醫(yī)美領(lǐng)域。該含干細(xì)胞外泌體的凍干貼包括以下組分：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體、海藻酸鈉、海藻糖、水解透明質(zhì)酸鈉、去離子水。該凍干貼的制備方法包括以下步驟：將海藻酸鈉、海藻糖和水解透明質(zhì)酸鈉用部分的去離子水進(jìn)行浸泡溶脹后，再與剩余的去離子水和臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體進(jìn)行攪拌混合，得到混合液；將混合液裝入模具中，并將裝有混合液的模具置于真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行凍干處理后，再經(jīng)脫模處理，得到凍干貼。本發(fā)明通過添加臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體制得的凍干貼，活性物含量高、使用方便，且具有淡化皺紋、改善肌膚光澤度以及提升皮膚柔潤度的作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細(xì)胞生物工程技術(shù)及醫(yī)美領(lǐng)域，具體是一種含干細(xì)胞外泌體的凍干貼及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

外泌體是由多泡體外膜和質(zhì)膜融合后釋放到細(xì)胞外環(huán)境中的納米級(jí)生物囊泡，直徑約30～150nm，可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、脂質(zhì)和核酸等，參與細(xì)胞間通訊、細(xì)胞遷移和免疫調(diào)節(jié)等過程，對(duì)機(jī)體的生理和病理過程發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是一種從胎兒臍帶華通氏膠中分離的干細(xì)胞，在再生醫(yī)學(xué)中發(fā)揮著重要作用。與其他來源的干細(xì)胞相比，人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有無創(chuàng)采集、低免疫原性、易于體外擴(kuò)增、倫理問題少等優(yōu)點(diǎn)，在細(xì)胞治療領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體是近幾年研究的熱點(diǎn)，因攜帶了人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的部分信息因子(主要是再生因子及多種生物活性因子)，并可介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞物質(zhì)傳遞和信息傳導(dǎo)，故人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體具有促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖和遷移、促進(jìn)Ⅰ型膠原和彈性蛋白合成、促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu)、抑制細(xì)胞凋亡和細(xì)胞過氧化等受體細(xì)胞修復(fù)性功效，發(fā)揮抗衰老、防止肌膚暗沉以及抑制皺紋產(chǎn)生的作用。

目前干細(xì)胞外泌體產(chǎn)品(即細(xì)胞相關(guān)的因子類產(chǎn)品等)基本上都是以凍干粉形式存在，由于干細(xì)胞外泌體凍干粉需要添加大量甘露醇等賦形劑，容易使細(xì)胞失水，故其存在活性物質(zhì)含量較低、功效差等問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明實(shí)施例的目的在于提供一種含干細(xì)胞外泌體的凍干貼，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明實(shí)施例提供如下技術(shù)方案：

一種含干細(xì)胞外泌體的凍干貼，包括以下按照重量份計(jì)的組分：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體0.0005～0.005份、海藻酸鈉0.1～1.5份、海藻糖0.05～1份、水解透明質(zhì)酸鈉0.05～0.2份、去離子水97.295～99.7995份。

作為本發(fā)明實(shí)施例的一個(gè)優(yōu)選方案，所述凍干貼包括以下按照重量份計(jì)的組分：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體0.001～0.003份、海藻酸鈉0.8～1.2份、海藻糖0.4～0.6份、水解透明質(zhì)酸鈉0.08～0.12份、去離子水98.077～98.719份。

作為本發(fā)明實(shí)施例的另一個(gè)優(yōu)選方案，所述臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體的制備方法包括以下步驟：

培養(yǎng)P2代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，得到上清液；

對(duì)上述培養(yǎng)上清液進(jìn)行離心提取，得到沉淀物；

對(duì)上述沉淀物進(jìn)行洗滌后，再用生理鹽水進(jìn)行重懸，得到所述臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體。

本發(fā)明實(shí)施例的另一目的在于提供一種上述含干細(xì)胞外泌體的凍干貼的制備方法，其包括以下步驟：

按照上述重量份稱取臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體、海藻酸鈉、海藻糖、水解透明質(zhì)酸鈉、去離子水，備用；

將上述海藻酸鈉、海藻糖和水解透明質(zhì)酸鈉用部分的去離子水進(jìn)行浸泡溶脹后，再與剩余的去離子水和臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體進(jìn)行攪拌混合，得到混合液；

將上述混合液裝入模具中，并將裝有混合液的模具置于真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行凍干處理后，再經(jīng)脫模處理，得到所述的凍干貼。