[發明專利]一種含干細胞外泌體的凍干貼及其制備方法和應用在審
| 申請號： | 202010056135.5 | 申請日： | 2020-01-18 |
| 公開（公告）號： | CN111249211A | 公開（公告）日： | 2020-06-09 |
| 發明（設計）人： | 戴博;田麗軍;劉瑩;何婷婷;李敏;劉煒琳;聶蘇秦 | 申請（專利權）人： | 西安九州再生醫學集團有限公司 |
| 主分類號： | A61K8/98 | 分類號： | A61K8/98;A61K8/99;A61K8/02;A61Q19/08;A61Q19/00;A61Q19/02 |
| 代理公司： | 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335 | 代理人： | 吳甘棠 |
| 地址： | 710000 陜西省西安市高新區丈八街辦*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 干細胞 外泌體 凍干貼 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種含干細胞外泌體的凍干貼，其特征在于，包括以下按照重量份計的組分：臍帶間充質干細胞外泌體0.0005～0.005份、海藻酸鈉0.1～1.5份、海藻糖0.05～1份、水解透明質酸鈉0.05～0.2份、去離子水97.295～99.7995份。
2.根據權利要求1所述的一種含干細胞外泌體的凍干貼，其特征在于，所述凍干貼包括以下按照重量份計的組分：臍帶間充質干細胞外泌體0.001～0.003份、海藻酸鈉0.8～1.2份、海藻糖0.4～0.6份、水解透明質酸鈉0.08～0.12份、去離子水98.077～98.719份。
3.根據權利要求1或2所述的一種含干細胞外泌體的凍干貼，其特征在于，所述臍帶間充質干細胞外泌體的制備方法包括以下步驟：
培養P2代臍帶間充質干細胞，得到上清液；
對上述培養上清液進行離心提取，得到沉淀物；
對上述沉淀物進行洗滌后，再用生理鹽水進行重懸，得到所述臍帶間充質干細胞外泌體。
4.一種如權利要求1～3中任一項所述含干細胞外泌體的凍干貼的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
按照上述重量份稱取臍帶間充質干細胞外泌體、海藻酸鈉、海藻糖、水解透明質酸鈉、去離子水，備用；
將上述海藻酸鈉、海藻糖和水解透明質酸鈉用部分的去離子水進行浸泡溶脹后，再與剩余的去離子水和臍帶間充質干細胞外泌體進行攪拌混合，得到混合液；
將上述混合液裝入模具中，并將裝有混合液的模具置于真空冷凍干燥機進行凍干處理后，再經脫模處理，得到所述的凍干貼。
5.根據權利要求4所述的一種含干細胞外泌體的凍干貼的制備方法，其特征在于，所述將裝有混合液的模具置于真空冷凍干燥機進行凍干處理的步驟，具體包括：
將裝有混合液的模具置于-20～-10℃的溫度下進行一次預凍處理后，再置于-50～-30℃的溫度下進行二次預凍處理；
將上述二次預凍處理后的模具置于-5～5℃的溫度下進行一次干燥處理后，再置于10～30℃的溫度下進行二次干燥處理。
6.根據權利要求5所述的一種含干細胞外泌體的凍干貼的制備方法，其特征在于，所述將裝有混合液的模具置于-20～-10℃的溫度下進行一次預凍處理后，再置于-50～-30℃的溫度下進行二次預凍處理的步驟中，一次預凍處理的持續時間為20～50min，二次預凍處理的持續時間50～80min。
7.根據權利要求5所述的一種含干細胞外泌體的凍干貼的制備方法，其特征在于，所述將上述二次預凍處理后的模具置于-5～5℃的溫度下進行一次干燥處理后，再置于10～30℃的溫度下進行二次干燥處理的步驟中，一次干燥處理的持續時間為400～700min，二次干燥處理的持續時間200～500min。
8.根據權利要求5或7所述的一種含干細胞外泌體的凍干貼的制備方法，其特征在于，所述將上述二次預凍處理后的模具置于-5～5℃的溫度下進行一次干燥處理后，再置于10～30℃的溫度下進行二次干燥處理的步驟中，一次干燥處理的真空度為0.2～0.3mbar，二次干燥處理的真空度小于0.01mbar。
9.一種如權利要求4～8中任一項所述制備方法制得的凍干貼。
10.一種如權利要求1～3和權利要求9中任一項所述凍干貼在制備養顏美容品中的應用。
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