[發(fā)明專利]一種精確定量中藥中致癌物馬兜鈴酸的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010054095.0
• 申請(qǐng)日: 2020-01-17
• 公開（公告）號(hào): CN111141852A
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王軼男;張靖荷;周國(guó)偉;孫靜;宋泓辰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 齊魯工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 濟(jì)南知來(lái)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37276
• 代理人: 曹麗

本發(fā)明涉及一種精確定量中藥中致癌物馬兜鈴酸的方法，該方法包括以下步驟：將馬兜鈴酸標(biāo)準(zhǔn)品添加到不含馬兜鈴酸的中藥中，對(duì)其進(jìn)行樣品前處理?液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；將待分析中成藥進(jìn)行樣品前處理，獲得過(guò)濾液；利用液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)所述過(guò)濾液進(jìn)行測(cè)定，并將測(cè)定結(jié)果帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線求得待分析中藥中馬兜鈴酸含量情況；其中，所述前處理的步驟中：提取劑為乙腈，除水劑為氯化鈉和無(wú)水硫酸鎂，固相萃取劑為PSA。本發(fā)明的方法不僅快速、準(zhǔn)確，靈敏度較高，檢出限和定量限均較低，重復(fù)性好，線性范圍寬，具有良好的回收率和精密度，適合中成藥中2種馬兜鈴酸的確證和定量測(cè)定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析化學(xué)和/或食品安全領(lǐng)域，涉及現(xiàn)代分析技術(shù)建立及應(yīng)用，具體涉及一種精確定量中藥中致癌物馬兜鈴酸的方法。

背景技術(shù)

公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對(duì)本發(fā)明的總體背景的一些理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

馬兜鈴酸是一系列結(jié)構(gòu)類似的硝基菲羧酸，廣泛存在于馬兜鈴屬植物中，在一些中草藥如馬兜鈴、關(guān)木通、廣防己中含量較高。由于其強(qiáng)烈的致癌性與致畸性，馬兜鈴酸已被世界衛(wèi)生組織列為I類致癌物。2017年10月，國(guó)際權(quán)威雜志Science TranslationalMedicine以封面文章形式發(fā)布的一項(xiàng)重要研究成果指出，馬兜鈴酸誘變可能是中國(guó)乃至亞洲地區(qū)肝癌高發(fā)的原因之一。這一研究報(bào)告再一次引起人們對(duì)馬兜鈴酸健康危害的高度重視。

由于馬兜鈴酸的強(qiáng)致癌性，很多西方國(guó)家已全面禁止含有馬兜鈴酸的中藥出售。我國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局也陸續(xù)取消了關(guān)木通、廣防己和青木香的藥用標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)含馬兜鈴、尋骨風(fēng)、天仙藤、朱砂蓮的中藥制劑嚴(yán)格按處方藥管理。2015年，《中國(guó)藥典》徹底取消了含有馬兜鈴酸的中草藥。然而，含馬兜鈴酸的中藥被刪除出《中國(guó)藥典》，只會(huì)讓制藥方在訴訟中陷入不利境地，卻并不能禁止這些中藥的生產(chǎn)、售賣。因此，含有馬兜鈴酸的中成藥并未全面被禁。它們?nèi)员挥糜谥委燂L(fēng)濕、泌尿系統(tǒng)疾病等多種病癥。因此，全面監(jiān)控中成藥中的馬兜鈴酸的使用迫在眉睫。

中草藥中馬兜鈴酸的傳統(tǒng)檢測(cè)方法使用LC-MS、HPLC-MS/MS等儀器檢測(cè)，如一些文獻(xiàn)公開了一種測(cè)定中藥水提液或甲醇水取液中馬兜鈴酸的方法，該方法可以對(duì)中草藥水提取液中的馬兜鈴酸含量進(jìn)行測(cè)定。但是本公開發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，不同于特定目標(biāo)中草藥水中的馬兜鈴酸含量測(cè)定，中成藥由于已制成食用藥劑，或片劑或丸劑，其中添加大量其他成分，不利于馬兜鈴酸的檢測(cè)。尤其是某些中成藥中，在成分表中未標(biāo)明含有馬兜鈴酸而極少量添加的樣品，使用甲醇-水等傳統(tǒng)的體系萃取，難以精確測(cè)定中成藥中馬兜鈴酸的含量。此外，傳統(tǒng)的馬兜鈴酸提取劑甲醇等雖然對(duì)馬兜鈴酸具有很好的溶解性和提取效果，但是由于中成藥中馬兜鈴酸含量不僅極低，且含有其他同樣可以溶解在甲醇中的糖、食用色素等干擾成分。而且，還存在著回收率低、通用性差等技術(shù)問(wèn)題。

可見，急需建立一種高效、快捷、安全的前處理及液質(zhì)聯(lián)用方法來(lái)有效應(yīng)對(duì)中成藥中馬兜鈴酸檢測(cè)工作的需要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的正是基于現(xiàn)有技術(shù)中的研究現(xiàn)狀而提出的一種測(cè)定中藥中馬兜鈴酸類藥物的方法，以解決目前在處理中成藥樣品中，馬兜鈴酸的萃取效率低檢測(cè)限高等的缺陷，同時(shí)該方法相比其他公開方法，具有前處理用時(shí)短，萃取溶劑用量少等優(yōu)點(diǎn)，不僅靈敏度高、準(zhǔn)確性好、回收率高，顯著提高了檢測(cè)效率，還使檢測(cè)人員減少與有毒試劑的接觸。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供一種精確定量中藥中馬兜鈴酸的方法，該方法包括以下步驟：

將馬兜鈴酸標(biāo)準(zhǔn)品添加到不含馬兜鈴酸的中藥中，對(duì)其進(jìn)行樣品前處理-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；

將待分析中成藥進(jìn)行樣品前處理，獲得過(guò)濾液；