[發明專利]一種精確定量中藥中致癌物馬兜鈴酸的方法

在審

• 申請號: 202010054095.0
• 申請日: 2020-01-17
• 公開（公告）號: CN111141852A
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 王軼男;張靖荷;周國偉;孫靜;宋泓辰
• 申請（專利權）人: 齊魯工業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 濟南知來知識產權代理事務所(普通合伙) 37276
• 代理人: 曹麗

1.一種精確定量中藥中馬兜鈴酸的方法，其特征是，該方法包括以下步驟：

將馬兜鈴酸標準品添加到不含馬兜鈴酸的中藥中，對其進行樣品前處理-液相色譜-串聯質譜法測定，得到標準曲線；

將待分析中成藥進行樣品前處理，獲得過濾液；

利用液相色譜-串聯質譜法對所述過濾液進行測定，并將測定結果帶入標準曲線求得待分析中藥中馬兜鈴酸含量情況；

其中，所述前處理的步驟中：提取劑為乙腈，除水劑為氯化鈉和無水硫酸鎂，固相萃取劑為乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)。

2.如權利要求1所述的方法，其特征是，所述前處理包括以下方法：

將固體中藥樣品粉碎后與乙腈混合或液體中藥樣品與乙腈混合，進行超聲處理；加入氯化鈉和無水硫酸鎂，經振蕩后，離心，取上層有機相至含有PSA的分散固相萃取劑中，振蕩后，離心，取上清液氮吹，加入內標定容，然后用針式濾器過濾。

3.如權利要求2所述的方法，其特征是：室溫下超聲25～50min；

進一步的，超聲時間為30min。

4.如權利要求2所述的方法，其特征是：所述內標為苯并[cd]吲哚-2(1h)-酮。

5.如權利要求1所述的方法，其特征是，前處理步驟中，樣品：乙腈：除水劑：固相萃取劑的投料比例為1g：(5～15)mL：(2～8)g：(20～40)mg。

6.如權利要求1所述的方法，其特征是，所述除水劑中，氯化鈉與無水硫酸鎂的質量比例為1:2～6；

進一步的，樣品：乙腈：除水劑：固相萃取劑的投料比例為1g：10mL：5g：(30～40)mg。

7.如權利要求1所述的方法，其特征是，所述不含馬兜鈴酸的中藥可通過配方表和/或藥物功效中進行判斷，將其作為空白樣品，并加入馬兜鈴酸標準品，在此基礎上制作標準曲線。

8.如權利要求1所述的方法，其特征是，所述馬兜鈴酸標準品包括：馬兜鈴酸I和馬兜鈴酸II。

9.如權利要求1所述的方法，其特征是，色譜條件為：色譜柱：C18，色譜柱：150mm×4.6mm×5μm；

柱溫箱溫度：25℃；樣品室溫度：室溫；進樣量：5μL；流速為0.40mL/min；

流動相A：20mmol/L醋酸銨水溶液；流動相B：乙腈；

梯度洗脫條件：0～10.0min，10％～100％B；10.0～13.0min，100％B；13.0～15.0min，100％～10％B。

10.如權利要求1所述的方法，其特征是，質譜條件為：干燥氣溫度：325℃；干燥氣流量：6L/min；鞘氣溫度：550℃；鞘氣流量：11L/min；毛細管電壓：5500V；掃描方式：多反應監測模式檢測。