[發明專利]檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的引物及探針組合物、試劑盒、方法在審
| 申請號： | 202010052063.7 | 申請日： | 2020-01-17 |
| 公開（公告）號： | CN111154860A | 公開（公告）日： | 2020-05-15 |
| 發明（設計）人： | 劉福平;劉晶晶;鄭建權 | 申請（專利權）人： | 深圳會眾生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6883 | 分類號： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳市博銳專利事務所 44275 | 代理人： | 湯星星 |
| 地址： | 518000 廣東省深圳市寶安區航*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 slco1b1 apoe 基因 多態性 引物 探針 組合 試劑盒 方法 | ||
1.檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的引物及探針組合物，其特征在于，包括：用于檢測SLCO1B1位點的第一引物和第一探針；以及，用于檢測APOE位點的第二引物和第二探針；
其中，第一引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-4所示，第一探針的核苷酸序列如SEQ IDNo.9-10所示；第二引物的核苷酸序列如SEQ ID No.5-8所示，第二探針的核苷酸序列如SEQID No.11-12所示。
2.根據權利要求1所述的檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的引物及探針組合物，其特征在于，所述第一探針和第二探針的3’和5’端分別進行熒光標記。
3.檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1-2中任意一項所述的檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的引物及探針組合物。
4.根據權利要求3所述的用于檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的試劑盒，其特征在于，還包括MgCl2、dNTP和Tap酶；
所述MgCl2的終濃度為1-5mM；所述dNTP的終濃度為100-200nM；所述Tap酶的終濃度為2-5U。
5.檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)提取樣品DNA；
(2)采用PCR溶解曲線法，利用權利要求3或4所述的檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的試劑盒對樣品DNA進行PCR擴增；
(3)通過監測整個溶解過程當中的信號值隨溫度的變化規律，區分靶序列的基因型。
6.根據權利要求5所述的檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的方法，其特征在于，步驟(2)中，利用權利要求4所述的檢測SLCO1B1和APOE基因多態性的試劑盒對樣品DNA進行PCR擴增，采用PCR溶解曲線法進行PCR擴增的反應條件為：
第一階段：95℃，5min，1個循環；
第二階段：95℃，15s；57℃，30s；72℃，30s；35個循環；
第三階段：94℃，1min；40℃，2min；40-80℃，并收集熒光信號；1個循環。
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