[發明專利]一種結核分枝桿菌核酸適配子及其制備方法

在審

• 申請號: 202010051901.9
• 申請日: 2020-01-17
• 公開（公告）號: CN111218449A
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 吳燕玲;冀俊峰;鄒國源
• 申請（專利權）人: 上海孚清生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;C12N15/10
• 代理公司: 合肥東邦滋原專利代理事務所(普通合伙) 34155
• 代理人: 張海燕

1.一種結核分枝桿菌核酸適配子，其特征在于：通過SELEX篩選方法得到結核分枝桿菌特異親和的適配子，其核苷酸序列SEQ ID NO：0所示。

2.根據權利要求1所述的結核分枝桿菌核酸適配子，其特征在于：對其進行結構改造，篩選出SEQ ID NO：2-3。

3.權利要求1所述的結核分枝桿菌核酸適配子的制備方法，其特征在于：包括以下步驟，

通過構建單鏈寡核苷酸文庫，利用SELEX技術篩選H37Rv適配子，篩選后的飽和文庫，經克隆測序，獲得單個適配子SEQ ID NO：0；對獲得的單個適配子SEQ ID NO：0進行結構改造，獲得4個序列與二級結構均不同的適配子，SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQID NO：4；對4個適配子進行靈敏度檢測，對靈敏度最高的適配子SEQ ID NO：2進行二次改造，獲得4個序列與二級結構均不同的適配子SEQ ID NO：2-1、SEQ ID NO：2-2、SEQ ID NO：2-3、SEQ ID NO：2-4，檢測其對結核分枝桿菌標準株H₃₇Rv結合的靈敏度與特異性，獲得2個靈敏度和特異性均良好的適配子SEQ ID NO：2-2、SEQ ID NO：2-3，用于臨床痰液樣本中結核分枝桿菌的檢測，獲得靈敏度最高的適配子SEQ ID NO：2-3。