[發明專利]一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法

在審

• 申請號: 202010050381.X
• 申請日: 2020-01-14
• 公開（公告）號: CN111208228A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: 孟元華;龔燕;徐志飛;周小新;劉文衛;孔令燦;吳宇伉
• 申請（專利權）人: 無錫市疾病預防控制中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/08;B01D15/26;B01J20/20;B01J20/30
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 趙海波

1.一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

步驟一、步驟一、將固相萃取柱用5ml純水、5ml甲醇和5ml pH＝4乙酸水溶液進行純化；

步驟二、取20ml含MC-RR的水樣，用乙酸調節至pH＝1-12，以1ml/min通過純化后的固相萃取柱富集；

步驟三、使用95％甲醇+5％pH＝10氨水溶液的混合液5ml洗脫，洗脫液經氮氣吹干，用0.5ml甲醇溶解，供LC-MS/MS檢測。

2.根據權利要求1所述的一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法，其特征在于：所述固相萃取柱包括柱體，柱體內設置有上篩板和下篩板，上篩板和下篩板之間設置有菠蘿肉基質生物炭填料。

3.根據權利要求2所述的一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法，其特征在于：所述菠蘿肉基質生物炭填料制備方法如下：

將菠蘿洗凈后去皮切碎，取500g碎菠蘿肉于剛玉坩堝中置于氬氣保護下的馬弗爐中，先95℃烘烤3h，除去水分；然后，繼續在氬氣保護下將馬弗爐以55℃/min升溫至650℃，保持4h，冷卻后，用5％乙酸浸泡24h改性菠蘿肉生物炭，洗滌至中性，烘干，過100目網曬，即制成菠蘿肉生物炭填料。

4.根據權利要求3所述的一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法，其特征在于：在柱管底部設置下篩板，將5g菠蘿肉生物炭填料填充在固相萃取柱柱管中，振蕩固相萃取柱柱管，使菠蘿肉生物炭均勻分散后壓實，然后將上篩板固定固相萃取柱填料上方，即制得菠蘿肉基質生物炭填料固相萃取柱。

5.根據權利要求1所述的一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法，其特征在于：步驟二中MC-RR的水樣，用乙酸調節至pH＝4。

6.根據權利要求1所述的一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法，其特征在于：用過量的微MC-RR溶液通過固相萃取柱，測過柱液中MC-RR的含量，求得柱容量為4000μg。

7.根據權利要求1所述的一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法，其特征在于：添加已知低中高三種濃度MC-RR溶液通過固相萃取柱，測富集、純化后MC-RR的含量，計算出加標回收率在82.7-93.8％之間。

8.根據權利要求1所述的一種固相萃取柱用于水中MC-RR的富集、純化方法，其特征在于：步驟三之后依次再將固相萃取柱用95％甲醇+5％pH＝10氨水溶液的混合液10ml、10ml甲醇、10ml純水，以1ml/min洗滌，用氮氣吹干，留著下次重復使用。