[發明專利]結直腸癌腫瘤微環境檢測試劑、試劑盒、裝置及應用

在審

• 申請號: 202010047982.5
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN111235273A
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發明（設計）人: 張恒輝;李亞丹;趙海濤;林健振;錢娟娟
• 申請（專利權）人: 臻悅生物科技江蘇有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/574
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 路秀麗

1.一種結直腸癌腫瘤微環境檢測試劑，其特征在于，所述檢測試劑包括POLE基因突變檢測試劑以及如下至少一個組合中的至少一個分子標志物的抗體：

組合1：CD3、CD8、CD45RO、PD-1及PD-L1；

組合2：CD4、FOXP3、CD68、CD163、PD-L1及CD57。

2.根據權利要求1所述的檢測試劑，其特征在于，所述檢測試劑包括至少CD45RO分子標志物的抗體；優選地，所述檢測試劑包括至少CD8和CD45RO兩個所述分子標志物的抗體；更優選地，所述檢測試劑包括至少如下分子標志物的抗體：CD3、CD8、CD45RO、PD1、PD-L1及CD4。

3.根據權利要求2所述的檢測試劑，其特征在于，所述分子標志物的抗體記為一抗，所述檢測試劑還包括二抗，

優選地，所述二抗選自辣根過氧化物酶、PV-6001、PV-6002或PV-8000；

優選地，所述檢測試劑還包括發光試劑，更優選地，所述發光試劑選自帶熒光基團的酪胺鹽、520-FITC、540-AF517、570-Cy3、620-Cy3.5、650-Cy5或690-Cy5.5。

4.一種結直腸癌腫瘤微環境檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1至3中任一項所述的結直腸癌腫瘤微環境檢測試劑。

5.POLE基因突變檢測試劑以及如下至少一個組合中的至少一個分子標志物的抗體在制備檢測結直腸癌的腫瘤微環境相關的試劑盒中的應用，

組合1：CD3、CD8、CD45RO、PD-1及PD-L1；

組合2：CD4、FOXP3、CD68、CD163、PD-L1及CD57。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述分子標志物的抗體包括CD45RO的抗體；優選包括CD8的抗體和CD45RO的抗體；更優選地，所述包括至少如下分子標志物的抗體：CD3、CD8、CD45RO、PD1、PD-L1及CD4。

7.根據權利要求5或6所述的應用，其特征在于，所述應用包括：

采用POLE基因突變檢測試劑檢測POLE基因是否突變；以及

采用多重免疫組織化學的方法對所述分子標志物進行檢測，優選檢測如下至少兩種分子標志物的細胞陽性率：CD45RO+的細胞陽性率、CD8+的細胞陽性率及CD8+CD45RO+的細胞陽性率；更優選地，檢測CD45RO+及如下至少一種分子標志物的細胞陽性率：CD3+、CD8+、CD8+CD45RO+、CD3+PD1+、PD-L1+及CD4+；

優選地，檢測在POLE基因突變的情況下，所述CD45RO+的細胞陽性率是否大于等于4.61％，所述CD8+的細胞陽性率是否大于等于2.78％，所述CD8+CD45RO+的細胞陽性率是否大于等于0.30％，所述CD3+的細胞陽性率是否大于等于5.83％，所述CD4+的細胞陽性率是否大于等于6.42％，所述CD3+PD1+的細胞陽性率是否大于等于0.75％，所述PD-L1+的細胞陽性率是否大于等于2.24％。