[發明專利]一種治療腎病的中藥組合物的有效成分檢測方法

有效

• 申請號: 202010045306.4
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN113125627B
• 公開（公告）日: 2022-10-18
• 發明（設計）人: 羅紅艷;朱雄;覃思光;李垚;劉宗耀;黃麗桃;胡德美
• 申請（專利權）人: 云南雷允上理想藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 李渤;郭廣迅

1.一種包含丹參、陳皮、黃連和牛膝的治療腎病的中藥組合物的有效成分檢測方法，所述檢測方法包括以下步驟：

(1)取中藥組合物，加入甲醇，加熱回流，冷卻，過濾，收集濾液，蒸干甲醇，加入水使溶解，加入乙醚萃取三次，合并乙醚層，乙醚層揮干乙醚，殘渣加無水乙醇溶解，作為原兒茶醛供試品溶液；水層加入乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯層，乙酸乙酯層蒸干乙酸乙酯，加入甲醇溶解，作為陳皮供試品溶液；水層加入水飽和正丁醇萃取三次，合并正丁醇層，正丁醇層加入0.01g/ml氫氧化鈉溶液洗滌三次，再加入水洗滌一次，棄去洗滌液，將正丁醇液蒸干溶劑，加入甲醇使溶解，制得牛膝或黃連供試品溶液；另取黃連對照藥材，加入甲醇，超聲提取，作為黃連對照藥材溶液；另取鹽酸小檗堿對照品，加入甲醇制成溶液，作為對照品溶液；吸取黃連供試品溶液、對照藥材溶液、對照品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，置于以體積比為6：3：1.5：1.5：0.3的甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水為展開劑的飽和氨水展開缸內，飽和，展開，取出，晾干，置于波長為365nm的紫外燈下檢視；

(2)取(1)項的牛膝供試品溶液，另取牛膝對照藥材，加入體積比為50％的甲醇水溶液，加熱回流，冷卻，過濾，加入水，加入乙醚洗滌兩次，收集水層，加入水飽和正丁醇萃取三次，合并正丁醇層，蒸干正丁醇，加入甲醇使溶解，作為對照藥材溶液；另取蛻皮甾酮對照品，加入甲醇制成溶液，作為對照品溶液；吸取牛膝供試品溶液、對照藥材溶液、對照品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，置于以體積比為10：2：0.05的二氯甲烷-甲醇-甲酸為展開劑的展開缸內，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸-乙醇溶液，105℃加熱至顯色；

(3)取(1)項的陳皮供試品溶液，另取陳皮對照藥材，加入水，加熱回流，冷卻，過濾，加入乙醚萃取三次，棄去乙醚層，收集水層，加入乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯液，蒸干乙酸乙酯，加入甲醇使溶解，作為對照藥材溶液；另取橙皮苷對照品適量，加入甲醇，制成飽和溶液，作為對照品溶液；吸取陳皮供試品溶液、對照藥材溶液、對照品溶液，分別點于同一聚酰胺薄層板上，置于以體積比為100：20：17的二氯甲烷-丙酮-甲醇為展開劑的展開缸內，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁-乙醇溶液反應，置于波長為365nm的紫外燈下檢視；

(4)取(1)項的原兒茶醛供試品溶液，另取原兒茶醛對照品，加無水乙醇制成溶液，作為對照品溶液；吸取兩種溶液分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為12∶1∶1的二氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鐵試液顯色。

2.權利要求1所述的檢測方法，其中所述供試品溶液的點樣量為：黃連供試品溶液為2-20μl；牛膝供試品溶液為2-20μl；陳皮供試品溶液為1-5μl；原兒茶醛供試品溶液為1-15μl。

3.權利要求2所述的檢測方法，其中所述供試品溶液的點樣量為：黃連供試品溶液為10μl；牛膝供試品溶液為10μl；陳皮供試品溶液為3μl；原兒茶醛供試品溶液為10μl。

4.權利要求1至3中任一項所述的檢測方法，其中所述中藥組合物包含丹參、大黃、太子參、黃連、牛膝、半夏、紅花、茯苓、陳皮和甘草。

5.權利要求4所述的檢測方法，其中按重量份數計，所述中藥組合物包含：太子參20-30份，半夏20-30份，茯苓16-24份，丹參56-84份，紅花8-12份，黃連8-12份，陳皮8-12份，大黃32-48份，牛膝16-24份和甘草8-12份。

6.權利要求5所述的檢測方法，按重量份數計，所述中藥組合物包含：太子參25份，半夏25份，茯苓20份，丹參70份，紅花10份，黃連10份，陳皮10份，大黃40份，牛膝20份和甘草10份。

7.一種包含丹參、陳皮、黃連和牛膝的治療腎病的中藥組合物中鹽酸小檗堿、蛻皮甾酮、橙皮苷和原兒茶醛中的一種、兩種或更多種的檢測方法，其通過權利要求1至6中任一項所述的檢測方法來實現。