[發明專利]一種高效快速檢測及定量血清或血漿核酸的試劑盒及方法有效
| 申請號: | 202010044493.4 | 申請日: | 2020-01-15 |
| 公開(公告)號: | CN111139313B | 公開(公告)日: | 2022-08-02 |
| 發明(設計)人: | 溫維佳;高一博;楊成勇 | 申請(專利權)人: | 深圳市尚維高科有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京華創智道知識產權代理事務所(普通合伙) 11888 | 代理人: | 彭隨麗 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳市龍崗區吉華街*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高效 快速 檢測 定量 血清 血漿 核酸 試劑盒 方法 | ||
1.一種高效快速檢測及定量血清或血漿核酸的試劑盒,包括核酸釋放劑、反應液、對照品、標準品、內標,其特征在于:
當模板為DNA時,所述的核酸釋放劑由300mM~600mM的KOH、質量濃度為0.06%~0.1%的十二烷基硫酸鋰或十二烷基硫酸鈉、體積百分濃度為0.05%~2%的吐溫20組成,溶劑為無核酶的去離子水;
當模板為RNA時,所述的核酸釋放劑由200mM~400mM的KOH、質量濃度為0.06%~0.1%的十二烷基硫酸鋰或十二烷基硫酸鈉、體積百分濃度為0.05%~2%的吐溫20組成,溶劑為無核酸酶的去離子水;
所述反應液由5mM~30mM的KCl、1mM~7mM的MgCl2 、0.1mM~3mM的EDTA-2Na、5mM~100mM的Tris-乙酸或Tris-HCl、5mM~20mM的(NH4)2SO4、質量濃度為0.01%~0.04%的BSA、體積百分濃度為2%~8%的甘油、0.1M~1.4M的甜菜堿、質量濃度為5%~15%的海藻糖、50nM~500nM的上下游引物、50nM~400nM的探針、0~400nM的內標探針、0.1mM~2.5mM的 dNTPs、混合酶、質量濃度為0.02%~0.05%的Proclin 300組成,pH7.0~8.5,溶劑為無核酸酶的去離子水。
2.根據權利要求1所述的高效快速檢測及定量血清或血漿核酸的試劑盒,其特征在于,所述dNTPs組成的濃度比例為:dATP:dGTP:dCTP:dTTP:dUTP=1:1:1:1:2。
3.根據權利要求1所述的高效快速檢測及定量血清或血漿核酸的試劑盒,其特征在于,所述的上下游引物、探針,其核酸序列是根據與試劑盒檢測項目一致的病原微生物的核酸序列而設計的特異性序列,所述的內標探針是根據內標序列設計的特異性探針,其中,探針、內標探針分別標記CY5、ROX、JOE、FAM、HEX、TET、TAMRA中的一種熒光。
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