[發(fā)明專利]一種黑虎耳草中巖白菜素化學(xué)對(duì)照品的分離制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010041563.0
• 申請(qǐng)日: 2020-01-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111187274B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高慶波;遲曉峰;馬小磊;曹倩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所
• 主分類號(hào): C07D493/04
• 分類號(hào): C07D493/04
• 代理公司: 成都華風(fēng)專利事務(wù)所(普通合伙) 51223
• 代理人: 杜朗宇

本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黑虎耳草中巖白菜素化學(xué)對(duì)照品的分離制備方法。其制備方法：提取、聚酰胺柱富集及微孔樹(shù)脂柱分離三個(gè)步驟。本發(fā)明成本低廉、產(chǎn)品純度大于98%；本發(fā)明采用的技術(shù)手段可進(jìn)行規(guī)模化生產(chǎn)：原料要求不高、成本低廉，易于批量備料；甲醇室溫冷浸提取，易于操作；采用聚酰胺柱富集，該分離材料可以裝于中壓柱系統(tǒng)并接在制備液相色譜上，易于規(guī)模化；分離中使用的微孔樹(shù)脂柱，為快速的等度方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黑虎耳草中巖白菜素化學(xué)對(duì)照品的分離制備方法。

背景技術(shù)

黑虎耳草（Saxifraga atrata）系屬虎耳草屬（Saxifraga L.）、虎耳草科（Saxifragaceae）植物。現(xiàn)代研究表明虎耳草屬植物中的化學(xué)成分主要包括酚類及黃酮類。現(xiàn)代藥理學(xué)的研究表明，虎耳草屬植物（包含黑虎耳草）具有多方面的藥理作用，如具有清熱、解毒、消炎、清肝、膽熱證，可治療風(fēng)疹、濕疹、中耳炎、丹毒、咳嗽吐血、痔疾等疾病。為了加快黑虎耳草的種質(zhì)資源評(píng)價(jià)和相關(guān)新藥的研發(fā)步伐，發(fā)展高純度化學(xué)對(duì)照品的高效制備方法，尤其規(guī)模化制備技術(shù)顯得尤為重要。

目前，有關(guān)從黑虎耳草中規(guī)模化快速制備化合物巖白菜素的文獻(xiàn)報(bào)道并未見(jiàn)，已有的研究也未做到系統(tǒng)化的研究。因此，亟需建立一種工藝簡(jiǎn)單、規(guī)模化從從黑虎耳草中規(guī)模化快速制備化合物巖白菜素的方法。

發(fā)明內(nèi)容

基于上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種黑虎耳草中巖白菜素化學(xué)對(duì)照品的分離制備方法。

一種黑虎耳草中巖白菜素化學(xué)對(duì)照品的分離制備方法，該方法具體包括如下步驟：

步驟1，提取：將黑虎耳草陰干，粉碎后加入其質(zhì)量10倍的甲醇，在室溫下提取3次，每次2~4 h，過(guò)濾、合并濾液，即濾液A，該濾液A按聚酰胺的量：黑虎耳草藥材的量=1:5~15拌樣并減壓干燥，即得黑虎耳草甲醇提取物拌樣樣品；

步驟2，聚酰胺柱富集：所述黑虎耳草甲醇提取物拌樣樣品，該樣品經(jīng)裝有聚酰胺材料的中壓色譜塔分離，經(jīng)檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm的紫外檢測(cè)器檢測(cè)，收集制備色譜圖中第一個(gè)主要的色譜峰餾分，該餾分經(jīng)減壓干燥即得含有目標(biāo)成分的組分；

步驟3，微孔樹(shù)脂柱分離：所述含有目標(biāo)成分的組分用體積分?jǐn)?shù)為30~80%的甲醇-水溶液溶解，配制樣品濃度為20.0~40.0 mg/mL，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，得到濾液，即濾液B，該濾液B經(jīng)微孔樹(shù)脂柱分離，經(jīng)檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm的紫外檢測(cè)器檢測(cè)，收集制備色譜圖中主要的色譜峰餾分，該色譜峰餾分經(jīng)減壓干燥得到純度大于99%的巖白菜素化學(xué)對(duì)照品。

進(jìn)一步的，所述步驟1、步驟2和步驟3中，減壓干燥的條件均為：真空度50~250mbar，溫度40~60℃。

進(jìn)一步的，所述步驟2中，聚酰胺分離的工作參數(shù)為色譜柱柱長(zhǎng)460 mm、直徑15~49mm，流動(dòng)相A為水，B為乙腈，色譜分離條件為：0~60min，0~50%B，進(jìn)樣量為16~40g，流速為10~110 mL/min。

進(jìn)一步的，所述步驟3中，微孔樹(shù)脂柱分離的工作參數(shù)是指色譜柱柱長(zhǎng)460 mm、直徑15~49 mm，微孔樹(shù)脂柱固定相為HP20SS或CHP20P，流動(dòng)相為體積分?jǐn)?shù)2~10%的乙腈-水溶液，進(jìn)樣體積為2~10 mL，流速為10~110 mL/min。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：

（1）本發(fā)明成本低廉、產(chǎn)品純度高

使用的提取溶劑，聚酰胺富集使用的溶劑、微孔樹(shù)脂分離溶劑均可以回收利用；使用的色譜分離材料（聚酰胺和微孔樹(shù)脂）均可以重復(fù)利用，回收利用的溶劑和重復(fù)利用的分離材料保證了分離過(guò)程中平均成本比較低廉，兩步中壓分離（聚酰胺柱富集和微孔樹(shù)脂柱分離）可以保證產(chǎn)品的純度大于98%。