[發(fā)明專利]提高西番蓮初代培養(yǎng)成活率的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010040060.1 | 申請(qǐng)日： | 2020-01-15 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN111109082A | 公開（公告）日： | 2020-05-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 劉潔云;牟海飛;蔡玲;黃永才;吳艷艷;黃偉華;田青蘭;彭嘉宇;張英俊;韋邵龍;韋弟 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 |
| 主分類號(hào)： | A01H4/00 | 分類號(hào)： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 南寧眾權(quán)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 45133 | 代理人： | 蘭亞君 |
| 地址： | 530007 廣西壯族*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 提高 西番蓮 培養(yǎng) 成活率 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種提高西番蓮初代培養(yǎng)成活率的方法，包括以下步驟：(1)初代培養(yǎng)基制備；(2)外植體培育：選擇西番蓮枝條，將枝條剪成含有1?2個(gè)芽的莖段，剪去部分葉片，扦插于育苗盆內(nèi)，置于大棚，扦插時(shí)噴一次殺菌、殺蟲及防控病毒的藥劑，每隔5?10天噴一次殺菌、殺蟲及防控病毒的藥劑，栽培一段時(shí)間后取枝條作為外植體進(jìn)行組培；(3)外植體消毒：剪去枝條的葉片，將枝條剪成多段，腋芽位于莖段中部，用含有HgCl2和抗壞血酸的消毒液消毒；(4)外植體接種及培養(yǎng)。本發(fā)明的方法，培養(yǎng)外植體材料，將材料置于棚內(nèi)培養(yǎng)，進(jìn)行前期殺菌等處理，提高外植體的清潔度，縮短HgCl2消毒時(shí)間，使初代培養(yǎng)污染率降低至15％以下。降低外植體褐化率，提高成活率。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及農(nóng)作物組培的技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種提高西番蓮初代培養(yǎng)成活率的方法。
背景技術(shù)
西番蓮是西番蓮科西番蓮屬的多年生常綠木質(zhì)藤本植物，原產(chǎn)南美洲的巴西至阿根廷一帶，在我國主要分布在臺(tái)灣、廣東、福建、廣西、云南等省，它集食用、藥用、油用和綠化觀賞為一體，經(jīng)濟(jì)價(jià)值高。西番蓮果實(shí)中果汁含量占果重30％-40％，富含人體必需的17種氨基酸、有機(jī)酸及VC、SOD、磷、鈣、鐵、鉀、蛋白質(zhì)等多種營養(yǎng)成分，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。目前我國西番蓮擴(kuò)繁主要采用實(shí)生苗與蔓條扦插繁殖，生產(chǎn)中存在較多問題，如實(shí)生苗的培育種子萌發(fā)率與成活率低，緩苗期長(zhǎng)、抗病性低、后代性狀差異大等問題；蔓條扦插繁殖若操作不當(dāng)會(huì)加快品種退化、病害增加致使產(chǎn)量降低，這些問題影響和制約了西番蓮的生產(chǎn)與加工。利用組織培養(yǎng)方法對(duì)西番蓮進(jìn)行快繁研究，可以對(duì)西番蓮植株進(jìn)行脫毒，克服無性繁殖率低、繁殖速度慢的缺點(diǎn)，加上組織培養(yǎng)不受季節(jié)和氣候等因素的制約，具有節(jié)約土地資源，速度快，質(zhì)量高，技術(shù)密集，便于集約化管理和工廠化生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。目前西番蓮組培快繁存在很多問題，其中外植體消毒過程中污染率高，褐化死亡率高，初代培養(yǎng)成活率低的問題，嚴(yán)重影響組培效率。
公開于該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對(duì)本發(fā)明的總體背景的理解，而不應(yīng)當(dāng)被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種提高西番蓮初代培養(yǎng)成活率的方法，從而克服西番蓮組培過程中污染率、褐化死亡率高，初代培養(yǎng)成活率低的缺點(diǎn)。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種提高西番蓮初代培養(yǎng)成活率的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)初代培養(yǎng)基制備；
(2)外植體培育：選擇西番蓮枝條，將枝條剪成含有1-2個(gè)芽的莖段，剪去部分葉片，扦插于育苗盆內(nèi)，置于大棚，扦插時(shí)噴一次殺菌、殺蟲及防控病毒的藥劑，之后每隔5-10天噴一次殺菌、殺蟲及防控病毒的藥劑，栽培一段時(shí)間后取枝條作為外植體進(jìn)行組培；
(3)外植體消毒：剪去枝條的葉片，將枝條剪成多段，腋芽位于莖段中部，然后用含有HgCl2和抗壞血酸的消毒液消毒；
(4)外植體接種及培養(yǎng)。
優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，初代培養(yǎng)基的制備方法包括以下步驟：
(1)初代培養(yǎng)基配方：MS基本培養(yǎng)基、6-BA 0.5-1.5mg/L、IBA 0.05-0.15mg/L、抗壞血酸0.001-0.02g/L、水解酪蛋白0.2-0.3g/L、蔗糖20-40g/L、瓊脂4-7g/L；
(2)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基PH至5.8-6.0，分裝在容器中，在容器口塞上棉塞，包覆牛皮紙并扎牢，然后在110-120℃條件下高壓滅菌15-20min。
優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，步驟(2)中剪去部分葉片為剪去葉片的2/3-3/4。
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