[發明專利]提高西番蓮初代培養成活率的方法

在審

• 申請號: 202010040060.1
• 申請日: 2020-01-15
• 公開（公告）號: CN111109082A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 劉潔云;牟海飛;蔡玲;黃永才;吳艷艷;黃偉華;田青蘭;彭嘉宇;張英俊;韋邵龍;韋弟
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南寧眾權專利代理事務所(普通合伙) 45133
• 代理人: 蘭亞君

1.一種提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)初代培養基制備；

(2)外植體培育：選擇西番蓮枝條，將枝條剪成含有1-2個芽的莖段，剪去部分葉片，扦插于育苗盆內，置于大棚，扦插時噴一次殺菌、殺蟲及防控病毒的藥劑，之后每隔5-10天噴一次藥劑，栽培一段時間后取枝條作為外植體進行組培；

(3)外植體消毒：剪去枝條的葉片，將枝條剪成多段，腋芽位于莖段中部，然后用含有HgCl₂和抗壞血酸的消毒液消毒；

(4)外植體接種及培養。

2.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(1)初代培養基的制備方法包括以下步驟：

(1)初代培養基配方：MS基本培養基、6-BA 0.5-1.5mg/L、IBA 0.05-0.15mg/L、抗壞血酸0.001-0.02g/L、水解酪蛋白0.2-0.3g/L、蔗糖20-40g/L、瓊脂4-7g/L；

(2)調節培養基PH至5.8-6.0，分裝在容器中，在容器口塞上棉塞，包覆牛皮紙并扎牢，然后在110-120℃條件下高壓滅菌15-20min。

3.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(2)中剪去部分葉片為剪去葉片的2/3-3/4。

4.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(2)中藥劑包括殺菌劑、殺蟲劑和防控病毒藥劑中的一種或幾種混合；噴灑時不同的藥劑交替使用；其中，

所述殺菌劑包括咪鮮胺、多菌靈、噁霉靈中的一種或幾種混合；

所述殺蟲劑包括高效氯氰菊酯、阿維菌素、啶蟲脒中的一種或幾種混合；

所述防控病毒藥劑包括阿泰靈、毒氟磷中的一種或幾種混合。

5.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(3)中的消毒液包括質量濃度為0.05-0.15％HgCl₂+0.005-0.05g/L抗壞血酸。

6.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(3)外植體消毒為：剪去枝條的葉片，置于質量濃度為2-4％的洗潔精溶液中浸泡10-15min，再用流水沖洗20-30min，然后置于殺菌劑溶液中浸泡10-15min，在超凈工作臺上用消毒液浸泡3-6min，再用無菌水沖洗多次。

7.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(3)中將枝條剪成3-9cm的小段。

8.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(3)中將枝條剪成6-9cm的小段。

9.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(4)外植體接種前對莖段進行處理，在超凈工作臺上切去莖段切口處0.3-1cm左右，接入培養基中的外植體長度保持5-7cm，將莖段接種在初代培養基上。

10.根據權利要求1所述的提高西番蓮初代培養成活率的方法，其特征在于，步驟(4)中莖段接種在初代培養基上，置于溫度為24-26℃、濕度低于40％的培養室中培養，光強為2000-3000lx，光照時間10-12h/天。