[發明專利]一種黃曲霉毒素降解菌的高效發酵方法

有效

• 申請號: 202010038988.6
• 申請日: 2020-01-14
• 公開（公告）號: CN111154679B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發明（設計）人: 周文文;韋顯雪;王樹雯;錢超
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L5/20;C12R1/07
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 鄭海峰

1.一種黃曲霉毒素降解菌的高效發酵方法，其特征在于：在黃曲霉毒素降解菌的發酵體系中添加合適的攜氧劑，步驟如下：

（1）種子液制備：將待用的黃曲霉毒素降解菌接種到LB培養基中培養得到種子液；所述的黃曲霉毒素降解菌為阿耶波多氏芽孢桿菌（Bacillus aryabhattai）DT，保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC No.14949，保藏日期為2017年11月22日；

（2）發酵培養：將步驟（1）所述種子液接種到LB培養基中；

（3）添加攜氧劑：在發酵培養4-10h后加入相對于發酵液體積百分比為0.5%-1.5%的十二烷；

（4）發酵培養15-25h認為發酵完畢。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：在所述步驟（1）中，培養條件為37℃、搖床轉速180rpm，培養時間為10-14h。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于：在所述步驟（2）中，將所述種子液以體積百分比2%-10%的比例接種到LB培養基中，培養溫度為37℃，搖床轉速220-240rpm。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的黃曲霉毒素降解菌保存于質量分數25%的甘油中并存放在-80℃冰箱中；在所述的步驟（1）使用前，還包括前置活化步驟；

所述的前置活化步驟具體為：先將菌種接種在LB瓊脂培養基上進行菌種活化，在37℃培養箱培養12-24h，待有菌落形成挑取適量單菌落接種到新的LB瓊脂培養基上，在37℃培養箱培養12-24h獲得待用的黃曲霉毒素降解菌。

5.如權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于：所述LB培養基為：氯化鈉10.0g/L、酵母浸粉5.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L，水為蒸餾水，121℃高壓滅菌20min；所述LB瓊脂培養基為：氯化鈉10.0g/L、酵母浸粉5.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、瓊脂條15~20g/L，水為蒸餾水，121℃高壓滅菌20min。