[發(fā)明專利]一種用微生物對(duì)鰻魚(yú)骨發(fā)酵制備功能性多肽的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010036521.8
• 申請(qǐng)日: 2020-01-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110923283A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王亮;何方舟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 肽晟堂生物科技（常州）有限公司
• 主分類號(hào): C12P21/00
• 分類號(hào): C12P21/00;C12P21/06;C07K1/34;C12R1/07;C12R1/125
• 代理公司: 常州市夏成專利事務(wù)所(普通合伙) 32233
• 代理人: 沈毅

1.一種用微生物對(duì)鰻魚(yú)骨發(fā)酵制備功能性多肽的方法，其特征在于，包括以下的步驟：（1）、將鰻魚(yú)魚(yú)骨原料，進(jìn)行粉碎過(guò)100至200目篩，得到鰻魚(yú)魚(yú)骨粉；

（2）、將步驟（1）中獲得的魚(yú)骨粉進(jìn)行第一次酶解，降解魚(yú)骨膠原蛋白骨架，獲得酶解粗產(chǎn)物；即把大分子蛋白質(zhì)初步分解成小分子蛋白；

（3）、將步驟（2）的酶解粗產(chǎn)物進(jìn)行超濾，除去大分子；

（4）、將步驟（3）所得的超濾后產(chǎn)物進(jìn)行滅酶處理；

（5）、將步驟（4）所得到的的濾液與水混合制備成微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基；

（6）、將蘇云金芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌接入步驟（5）中的培養(yǎng)基進(jìn)行微生物發(fā)酵；

（7）、將步驟（6）的發(fā)酵產(chǎn)物取液相進(jìn)行噴霧干燥制得功能性多肽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用微生物對(duì)鰻魚(yú)骨發(fā)酵制備功能性多肽的方法，其特征是，所述步驟（2）具體步驟如下：將步驟(1)中獲得的魚(yú)骨粉按照固液比1:2至1:3加水制成懸濁液，再加入胰蛋白酶 、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶，其中胰蛋白酶為魚(yú)骨粉質(zhì)量的0.15％至0.25％，木瓜蛋白酶質(zhì)量為魚(yú)骨粉質(zhì)量的0.25％至0.35％，中性蛋白酶質(zhì)量為魚(yú)骨粉質(zhì)量的0.10％至0.20％，其酶解溫度范圍控制在35℃至45℃之間，酶解時(shí)間控制在2小時(shí)至3小時(shí)，持續(xù)進(jìn)行攪拌。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用微生物對(duì)鰻魚(yú)骨發(fā)酵制備功能性多肽的方法，其特征是，所述步驟（3）具體步驟如下：將步驟（2）中獲得的酶解粗產(chǎn)物用超濾膜進(jìn)行過(guò)濾，將大分子的蛋白質(zhì)除去，留下分子量少于5000Da的分子蛋白。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用微生物對(duì)鰻魚(yú)骨發(fā)酵制備功能性多肽的方法，其特征是，所述步驟（4）將步驟（3）所得的超濾產(chǎn)物加熱至90℃以上，維持15分鐘以上進(jìn)行滅酶。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的是一種用微生物對(duì)鰻魚(yú)骨發(fā)酵制備功能性多肽的方法，其特征是，所述步驟（5）將步驟（4）所得的滅酶后的產(chǎn)物在無(wú)菌條件下與無(wú)菌水按照質(zhì)量比1:1.5至1:2.5的比例混合制成培養(yǎng)基。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的是一種用微生物對(duì)鰻魚(yú)骨發(fā)酵制備功能性多肽的方法，其特征是，所述步驟（6）將蘇云金芽孢桿菌按照1.5％至3.0％，枯草芽孢桿菌按照3％至5％的接菌量，在無(wú)菌操作臺(tái)中接入步驟（5）中制備好的培養(yǎng)基，使其在恒溫35.5℃的條件下?lián)u甁震蕩發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為64h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的是一種用微生物對(duì)鰻魚(yú)骨發(fā)酵制備功能性多肽的方法，其特征是，所述步驟（7）將步驟（6）的微生物發(fā)酵產(chǎn)物取液相部分，通過(guò)噴霧干燥的方法制得粉末狀的鰻魚(yú)骨多肽，要求噴霧干燥時(shí)，進(jìn)風(fēng)溫度控控制在110至150℃，出風(fēng)溫度控制在70至90℃。