[發(fā)明專利]單核細(xì)胞增生李斯特菌的快速恒溫檢測(cè)方法、引物組及試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010036143.3
• 申請(qǐng)日: 2016-08-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111020010B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉偉;李雪玲;李園園;賈犇;韋朝春;陸長(zhǎng)德;李亦學(xué);曹永梅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院;上海旺旺食品集團(tuán)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6844
• 分類號(hào): C12Q1/6844;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01
• 代理公司: 上海麥其知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31257
• 代理人: 董紅曼

1.一種針對(duì)單核細(xì)胞增生李斯特菌的快速恒溫檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括能擴(kuò)增單核細(xì)胞增生李斯特菌基因組特異性堿基序列的引物組，所述能擴(kuò)增單核細(xì)胞增生李斯特菌基因組特異性堿基序列的引物組為引物組A或引物組A’；

引物組A：

上游外引物F3_A：5’-TGAAAATCGGGGTAGCAAT-3’(SEQ?ID?NO：1)；

下游外引物B3_A：5’-GGGGAATCAAAACAGAATCC-3’(SEQ?ID?NO：2)；

上游內(nèi)引物FIP_A：5’-AACGCAGAAGCATTAGTCACCGCCCGAACTTGATTCAAT-3’(SEQ?ID?NO：3)；

下游內(nèi)引物BIP_A：5’-ATGCACTTCGATGATGTTCACTGGCTTACAGGATTAACTCAAC-3’(SEQ?IDNO：4)；

引物組A’：

上游外引物F3_A：5’-TGAAAATCGGGGTAGCAAT-3’；

下游外引物B3_A：5’-GGGGAATCAAAACAGAATCC-3’；

上游內(nèi)引物FIP_A：5’-AACGCAGAAGCATTAGTCACCGCCCGAACTTGATTCAAT-3’；

下游內(nèi)引物BIP_A：5’-ATGCACTTCGATGATGTTCACTGGCTTACAGGATTAACTCAAC-3’；上游環(huán)引物L(fēng)F_A：5’-GCGCATTCAGATATTCAATTGGC-3’(SEQ?ID?NO：9)；

和/或，下游環(huán)引物L(fēng)B_A：5’-CCATTCGTTACTAATTCATTTGCCG-3’(SEQ?ID?NO：10)。

2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，其還包括Bst?DNA聚合酶反應(yīng)緩沖液、BstDNA聚合酶、dNTP溶液、Mg²⁺、甜菜堿中的一種或多種。

3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的酶反應(yīng)體系包括：1×BstDNA聚合酶反應(yīng)緩沖液，2-9mmol/L?Mg²⁺，1.0-1.6mmol/L?dNTP，0.8-2.0μmol/L的FIP_A和BIP_A引物，0.15-0.3μmol/L的F3_A和B3_A引物，包括或不包括0.4-1.0μmol/L的LF_A和/或LB_A引物，0.16-0.64U/μL?Bst?DNA聚合酶，和0-1.5mol/L的甜菜堿。

4.如權(quán)利要求1～3之任一項(xiàng)所述的試劑盒在非診斷目的的恒溫檢測(cè)單核細(xì)胞增生李斯特菌中的應(yīng)用。