[發明專利]霍亂弧菌O1群的核酸快速恒溫檢測方法及試劑盒

有效

• 申請號: 202010036105.8
• 申請日: 2016-08-30
• 公開（公告）號: CN111020008B
• 公開（公告）日: 2022-10-28
• 發明（設計）人: 李雪玲;劉偉;李園園;賈犇;韋朝春;陸長德;李亦學;曹永梅
• 申請（專利權）人: 上海產業技術研究院;上海旺旺食品集團有限公司
• 主分類號: C12Q1/6844
• 分類號: C12Q1/6844;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/63
• 代理公司: 上海麥其知識產權代理事務所(普通合伙) 31257
• 代理人: 董紅曼

1.一種針對霍亂弧菌O1群的快速恒溫檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括能擴增霍亂弧菌O1群基因組特異性堿基序列的引物組；其中，所述能擴增霍亂弧菌O1群基因組特異性堿基序列的引物組選自引物組A或B；

引物組A：

上游外引物F3_A：5’- CCACTTATTCGCTTTACACA -3’（SEQ ID NO：1）；

下游外引物B3_A：5’- TTTCGATGGTGTAATCATCC -3’（SEQ ID NO：2）；

上游內引物FIP_A：5’- GCAAAGTGAAACGCATGGTTGGAATTTGAACCTCGTCTG -3’（SEQ IDNO：3）；

下游內引物BIP_A：5’- GTGGTATGGACGTTCAATCGTCAGAGGTTCAAAAATCCCTT -3’（SEQ IDNO：4）；

引物組B：

上游外引物F3_B：5’- ATCCGCCAGATGTGCGAT -3’（SEQ ID NO：5）；

下游外引物B3_B：5’- GGGAATCCAGATCCCTAGTTTG -3’（SEQ ID NO：6）；

上游內引物FIP_B：5’- GCGGATCGGTAAACAGCTGCTCCGTTGGGGTCATGCAGATG -3’（SEQ IDNO：7）；

下游內引物BIP_B：5’- TGCCTGAATTTACAGGCTTACGCGATCGCCAACCCAAGTTGG -3’（SEQ IDNO：8）。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，其還包括Bst DNA聚合酶反應緩沖液、BstDNA聚合酶、dNTP 溶液、Mg²⁺、甜菜堿中的一種或多種。

3.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的酶反應體系包括：1× BstDNA聚合酶反應緩沖液，2-9mmol/L Mg²⁺，1.0-1.6mmol/L dNTP，0.8-2.0μmol/L的FIP和BIP引物，0.15-0.3μmol/L的F3和B3引物，0.16-0.64U/μL Bst DNA聚合酶，和0-1.5mol/L的甜菜堿。

4.如權利要求1~3之任一項所述的試劑盒在非診斷目的的恒溫檢測霍亂弧菌O1群中的應用。