[發明專利]一種從小駁骨中提取三萜類化合物駁骨萜A的方法及其應用

有效

• 申請號: 202010035741.9
• 申請日: 2020-01-14
• 公開（公告）號: CN111187327B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 孫彥君;馮衛生;陳輝;張艷麗;時博;韓紅艷;李漢偉;高美玲;陳豪杰;韓瑞杰;趙晨
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07J7/00
• 分類號: C07J7/00;A61K31/57;A61P35/00;A61P1/16
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

本發明涉及從小駁骨中提取新三萜類化合物駁骨萜A的方法及其應用，有效解決從小駁骨中提取新三萜類化合物駁骨萜A，用于制備抗肝惡性腫瘤的藥物問題，小駁骨用乙醇加熱回流提取，減壓回收乙醇，得到的浸膏狀乙醇提取物混懸于蒸餾水中，依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次，將乙酸乙酯萃取部位經硅膠吸附柱色譜分離，用石油醚?丙酮混合溶劑系統進行梯度洗脫，收集流份，減壓回收溶劑，得濃縮物，經反相ODS柱色譜，用甲醇?水混合溶劑系統進行梯度洗脫，收集流份，減壓濃縮，經硅膠柱色譜，用石油醚?丙酮混合溶劑系統梯度洗脫，收集含有目標化合物的流份即為駁骨萜A。本發明原料豐富，制備方法易操作，開拓了小駁骨的藥物價值和商業價值。

技術領域

本發明涉及醫藥，特別是一種從小駁骨中提取新三萜類化合物駁骨萜A的方法及其應用。

背景技術

小駁骨為爵床科植物小駁骨(Gendarussa vulgaris Nees)的干燥地上部分。廣泛分布于我國廣西、廣東、海南等省。具有祛瘀鎮痛、續筋接骨之功效，主要用于跌打損傷、筋傷骨折、風濕骨痛、血瘀經閉及產后腹痛。在我國已有較長的應用歷史，在《本草綱目拾遺》、《生草藥性備要》、《嶺南采藥錄》、《陸川本草》等醫藥古籍中均有記載。2010年作為新增藥材，收載于《中華人民共和國藥典》。近年來關于小駁骨化學成分及生物活性的研究受到國內外學者的廣泛關注，化學成分主要包括生物堿、黃酮、香豆素、三萜等類型。生物活性研究表明，具有抗炎、止痛、保肝、抗氧化、免疫抑制、抗血管生成、抗人獲得性免疫缺陷病毒、驅蟲、抗焦慮等作用。

惡性腫瘤已經成為當前嚴重影響人類健康、威脅人類生命的主要疾病之一。肝癌是指發生于肝臟的惡性腫瘤，全世界每年新發肝癌患者約60萬，發病率居惡性腫瘤的第五位，其死亡率僅次于胃癌和食道癌居第三位。我國每年死于肝癌的患者約11萬，占全世界肝癌死亡人數的45％。目前臨床上廣泛使用的合成的抗肝癌藥物普遍存在著毒副作用，如脫發、貧血和胃腸不適等現象。因此加強肝癌治療的研究，延長患者的生存期，改善患者的生活質量是藥學工作者的當務之急。中草藥在抗腫瘤方面的應用歷史悠久，從中草藥中尋找高效低毒的抗腫瘤活性物質，研制選擇性強、毒副作用低的新型抗腫瘤藥物是藥學科研工作者迫切解決的首要問題，但迄今為止未見有如何從小駁骨中提取新三萜類化合物駁骨萜A，并用于治療惡性腫瘤的公開報導。

發明內容

針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種從小駁骨中提取新三萜類化合物駁骨萜A的方法及其應用，可有效解決從小駁骨中提取新三萜類化合物駁骨萜 A，并用于制備抗肝惡性腫瘤的藥物問題。

本發明解決的技術方案是，一種從小駁骨中提取新三萜類化合物駁骨萜A的方法，該化合物為駁骨萜A，分子結構式為：

其制備方法是，以小駁骨15–20kg為原料，以2–5倍原料重量的、體積濃度為75％–95％的乙醇加熱回流提取3次，提取溫度為90–95℃，每次提取時間為1小時，減壓回收乙醇，得浸膏狀乙醇提取物；將浸膏狀乙醇提取物混懸于3.6–4.8L的蒸餾水中，依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次，每次3.6–4.8L，時間為1.5小時；將乙酸乙酯萃取部位經硅膠吸附柱色譜分離，依次用體積比為100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶劑系統進行梯度洗脫，每一梯度用3.7–5.0L洗脫液，流速為10–15mLmin^-1，收集100︰20的石油醚-丙酮洗脫流份，減壓回收溶劑，得濃縮物；將該濃縮物經反相ODS柱色譜，依次用體積比為70︰30、80︰ 20甲醇-水混合溶劑系統進行梯度洗脫，每一梯度用500–1000mL洗脫液，流速為 7–10mLmin^-1，收集體積比為80︰20甲醇-水的洗脫流份，減壓濃縮后，得到濃縮物；將該濃縮物經硅膠柱色譜，依次用體積比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶劑系統梯度洗脫，每一梯度用150–200mL洗脫液，流速為8–12mLmin^-1，收集含有目標化合物的流份即為駁骨萜A。