[發明專利]產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株的篩選方法、菌株及其制備得到的脂肪酶

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• 申請號: 202010034954.X
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN111154663A
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發明（設計）人: 楊宇童
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N9/20;C12R1/72
• 代理公司: 北京超成律師事務所 11646
• 代理人: 李雪嬌

1.一種產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株的篩選方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

首先采集含有近平滑假絲酵母菌株的土壤并接種到富集培養液中對菌株進行富集培養，然后將富集得到的培養液涂布于乳化平板培養基中進行篩選培養，隨后將篩選培養后的菌落進行純化得到產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株。

2.根據權利要求1所述的產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株的篩選方法，其特征在于，所述富集培養液主要由碳酸銨、硝酸銨、七水硫酸鎂和磷酸氫二鉀組成；

優選的，所述每L富集培養液中包括硫酸銨0.14～0.16g、硝酸銨0.08～0.1g、七水硫酸鎂0.04～0.06g、磷酸氫二鉀0.01～0.02g和橄欖油0.01～0.03L，所述富集培養液的pH為6～8；

更優選的，所述富集培養液的pH為7。

3.根據權利要求1所述的產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株的篩選方法，其特征在于，所述菌株富集培養的次數為3～5次；

優選的，每次富集培養的時間為10～15h。

4.根據權利要求1所述的產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株的篩選方法，其特征在于，所述乳化平板培養基為維多利亞藍乳化平板培養基；

優選的，所述維多利亞藍乳化平板培養基主要由硫酸銨、氯化鈉、硝酸銨、七水硫酸鎂、磷酸氫二鉀、瓊脂粉和維多利亞藍溶液組成；

更優選的，每L維多利亞藍乳化平板培養基中包括硫酸銨1～1.5g、氯化鈉1～1.5g、硝酸銨0.5～1g、七水硫酸鎂0.5～1g、磷酸氫二鉀0.1～0.3g、瓊脂粉15～25g。

5.一種產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株，其特征在于，所述產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株由上述權利要求1～4任一項所述的產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株的篩選方法篩選得到。

6.一種脂肪酶，其特征在于，所述脂肪酶由權利要求5所述的產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株發酵純化制得。

7.一種脂肪酶的制備方法，其特征在于，所述脂肪酶的制備方法包括以下步驟：

將權利要求5所述產脂肪酶的近平滑假絲酵母菌株接種于發酵培養基中發酵培養并純化，得到所述脂肪酶。

8.根據權利要求7所述的脂肪酶的制備方法，其特征在于，所述近平滑假絲酵母菌株的接種量為0.5～2wt％。

9.根據權利要求7所述的脂肪酶的制備方法，其特征在于，所述發酵培養基為加入脂肪的酵母蛋白胨培養基。

10.根據權利要求7所述的脂肪酶的制備方法，其特征在于，所述發酵培養為搖瓶培養，所述搖瓶培養的溫度為25～35℃、轉速為150～250r/min、時間為60～75h。