[發明專利]一種用于體內殺菌且提高生物軟骨組織修復性能的方法

在審

• 申請號: 202010031618.X
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN111166934A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 徐淑波;張世超;孫化鑫;孫海波;劉建營;王瀚林;孫星
• 申請（專利權）人: 山東建筑大學
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/56;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/12;A61L27/18;A61L27/16;A61L27/02
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• 代理人: 暫無信息

1.一種用于軟骨修復的纖維蛋白材料的制備，該纖維蛋白材料是凝血酶作用下凝膠化的纖維蛋白原支架，支架中含有相互連通的多孔結構，小孔孔徑為2～10μm，支架的孔隙率為40～70％，該方法步驟如下：

(1)PLGA微球的制備

a)配制PVA17-88的水溶液（1%），（17 表示平均聚合濃度1700~1800，88 表示醇解度均為88%）；

b)取100mgPLGA(LA/GA=50/50，分子量5.5萬)，溶于1ml的氯仿中:另取10mgAgCl粉末沉淀物，加入此氯仿中，加入10uL三乙胺，靜置10分鐘，觀察是否溶解，若不溶解，繼續加5uL即可；

c）在1000rpm不停攪拌下，取上述氯仿溶液，逐滴加入含PVA17-88的水溶液中，水溶液的體積是是氯仿體積的25倍，加完后，高速（7000rpm）均質15s，轉移至通風櫥中，繼續攪拌(600rpm)2分鐘后，補加等體積蒸餾水，繼續攪拌4小時；

d) 待氯仿揮發完后，取溶液高速離心(15000rpm，溫度4度) 1min，加適量蒸餾水分散后，凍干；

e）因為我們所需要的支架中的多孔結構孔徑為2～10μm，根據要求標準選擇粒徑為10～20μm的PLGA微球作為致孔劑；

f）將PLGA微球和纖維蛋白粉按不同配比濃度1:1、1:2、1:3(g/mL)混合制成不同形狀的復合材料，將混合物填入模具中壓實，排出混合物中的空氣，將模具及混合物放置65度溫度下，達到使PLGA微球熔融粘結的溫度，然后冷卻到室溫；

(2) 纖維蛋白凝膠制備

a)將纖維蛋白原溶解在生理鹽水中,充分孵育10分鐘至纖維蛋白原完全溶解，

配制成10-40mg/ml的纖維蛋白原溶液；

b)將凝血酶溶解在40mlCaCl溶液中，配制成1-20U/ml的凝血酶溶液，將等體積的纖維蛋白原溶液和凝血酶的氯化鈣溶液(1-20U/ml. 40mlCaCl)混合，并放置到裝有碎冰的燒杯中，然后置于超聲波破碎儀中（超聲波探頭頻率為20KHz，直徑6mm的鈦金屬探頭），超生時間設置為6min，加碎冰控制樣品溫度為4-8度，將超聲處理后的溶液置于模具中放于37度環境中保持1天，獲得纖維蛋白凝膠；

(3) 將纖維蛋白凝膠從模具中移出，真空冷凍干燥得到纖維蛋白原支架，植入人體后，等PLGA攜帶藥物的釋放及PLGA微球降解便獲得多孔纖維蛋白原支架。

2.根據權利要求1所述的一種用于體內殺菌且提高生物軟骨組織修復性能的方法，PLGA微球可以攜帶對人體有益的物質，在此基礎上，在PLGA微球內混入了銀離子，人體可以對銀離子吸收，有殺菌的效用，多孔結構增加了物質交換和生物信號交流的速度，營養物質在人體內經過多孔時交換速度增加。

3.根據權利要求1所述的一種用于體內殺菌且提高生物軟骨組織修復性能的方法，PLGA微球進入人體后可降解，并且高濃度纖維蛋白原提高了力學性能，當多孔結構的纖維蛋白軟骨修復材料移植到體內后，與人體骨組織具有良好的相容性，具有良好的結合能力，將實現軟骨的再生。

4.根據權利要求1所述的一種用于體內殺菌且提高生物軟骨組織修復性能的方法，超聲對纖維蛋白凝膠的制備具有促進作用，可以加快凝血酶溶液溶解的速度，且在超聲的作用下，溶液制備的更加均勻。