[發明專利]一種用于體內殺菌且提高生物軟骨組織修復性能的方法

在審

• 申請號: 202010031618.X
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN111166934A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 徐淑波;張世超;孫化鑫;孫海波;劉建營;王瀚林;孫星
• 申請（專利權）人: 山東建筑大學
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/56;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/12;A61L27/18;A61L27/16;A61L27/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及醫藥支架領域，是一種有利于軟骨修復的纖維蛋白材料。該纖維蛋白材料是凝血酶作用下凝膠化的纖維蛋白原支架，支架中PLGA可攜帶Ag離子用于人體殺菌，可降解。高濃度纖維蛋白原提高了力學性能，提升了支架材料的耐降解性能。由于多孔的存在物質交換和生物信號交流的速度加快。營養物質在人體內經過多孔時交換速度增加。當多孔結構的纖維蛋白軟骨修復材料移植到體內后，與人體骨組織具有良好的相容性，具有良好的結合能力，將實現軟骨的再生。可實現軟骨原位誘導再生，達到原位再生修復的目的，具有良好的臨床應用前景。克服了目前臨床膠原蛋白不能良好地修復骨軟骨組織損傷的現象。

技術領域

本發明涉及醫藥支架領域，涉及一種體內殺菌并且提高軟骨組織修復性能的方法。

背景技術

關節表面是由軟骨覆蓋成為關節軟骨，軟骨正常情況下是對關節有很好的保護作用，摩擦力很低，允許關節能夠正常的做各種彎曲和伸直的活動，這樣的關節是正常的，不會有任何不適疼痛腫脹甚至彎曲受限都不會有這樣的問題。但是如果由于一些原因軟骨發生損傷，就會造成軟骨的腫脹，表面起毛侵蝕龜裂破碎甚至脫落，嚴重的時候軟骨下面的骨會暴露出來，這種軟骨損傷治療起來有一定的困難。軟骨是沒有血管的，里面有沒有神經，軟骨損傷開始可能沒有癥狀但是隨著軟骨損傷加重，軟骨下的骨暴露，軟骨下的骨是有血管神經的，這樣軟骨下的骨也會受到損傷就會出現癥狀，出現的癥狀主要是疼痛為主，有的時候這種疼痛可能會比較模糊有時候可能比較尖銳在一些活動時候都會出現，例如上下樓梯膝蓋正軟骨損傷造成疼痛感會加重。

為克服這個問題，通過制作多孔纖維蛋白原支架，實現一端硬度高似固體可以黏附骨致密部，另一端彈性好似海綿可填補軟骨的損傷空間，可以提高組織再生過程中細胞與細胞以及新生組織與原生組織之間的相互信號溝通，更好地實現新生組織的結構和功能化重塑。這樣同時促進了骨軟骨的再生以及與骨致密部的融合。

膠原，膠原是細胞外基質的主要成分，是人體中含量最豐富的一種結構蛋白。常用作組織工程材料的膠原主要是I型膠原，其中I型膠原在臨床應用最為廣泛。優點:來源廣泛,容易獲得、免疫原性低、生物安全性及生物相容性好、可降解吸收，且降解速率可控帶有較多功能基團、利于改性、便于加工成多種形狀。缺點:降解速率過快、機械強度不足、獲得高純度的膠原費用高。細胞外基質有其特殊的結構及功能蛋白組合,異體或異種的細胞抗原會被宿主細胞認作異物,從而誘導炎癥反應或免疫排斥反應，脫細胞的方法通過去除組織或器官的細胞，而保留細胞外基質成分及結構。脫細胞材料也一直是組織工程產品構建原材料來源,由于軟骨組織結構致密,難于將較厚的軟骨進行脫細胞，研究發現通過粉碎軟骨基質后再運用脫細胞試劑處理的方法可以將軟骨內細胞成分去除，保留軟骨細胞外基質成分，并通過凍干及交聯的方法制備多孔生物支架。

發明內容

本發明公開了一種有利于軟骨修復的纖維蛋白材料。為了修復軟骨，特意研發了一種用于修復人體軟骨的多孔結構。配制PVA17-88的水溶液。

取100mgPLGA(LA/GA=50/50，分子量5.5萬)，溶于1ml的氯仿中:另取10 mgAgCl粉末沉淀物，加入此氯仿中，加入10uL三乙胺，靜置10分鐘，觀察是否溶解，若不溶解，繼續加5uL即可。

在1000rpm不停攪拌下，取上述氯仿溶液，逐滴加入含PVA17-88的水溶液中，水溶液的體積是是氯仿體積的25倍，加完后，高速（7000rpm）均質15s。轉移至通風櫥中，繼續攪拌(600rpm)2分鐘后。補加等體積蒸餾水，繼續攪拌4小時。

待氯仿揮發完后，取溶液高速離心(15000rpm，溫度4度) 1min，加適量蒸餾水分散后，凍干。由于小孔的孔徑是2～10μm，我們根據要求標準選擇粒徑為2～10μm的PLGA微球作為致孔劑。

將PLGA微球和纖維蛋白粉按不同配比濃度1:1、1:2、1:3(g/mL)混合制成不同形狀的復合材料，將混合物填入模具中壓實，排出混合物中的空氣，將模具及混合物放置65度溫度下，達到使PLGA微球熔融粘結的溫度，然后冷卻到室溫。