[發(fā)明專利]基于CoOOH-TMB氧化系統(tǒng)的比色方法用于檢測谷胱甘肽

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010030810.7
• 申請(qǐng)日: 2020-01-13
• 公開（公告）號(hào): CN111024636B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 袁玲玲;郭文娟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇長星醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N21/31
• 分類號(hào): G01N21/31;G01N1/38
• 代理公司: 佛山市智匯聚晨專利代理有限公司 44409
• 代理人: 曹麗敏

本公開涉及一種基于CoOOH?TMB氧化系統(tǒng)的比色方法檢測谷胱甘肽的方法及其試劑盒，檢測GSH的方法包括以下步驟：將待測樣品與羥基氧化鈷納米片溶液混合后進(jìn)行孵育，獲得混合溶液一；向混合溶液一中加入醋酸?醋酸鹽緩沖溶液和四甲基聯(lián)苯胺溶液，混合均勻，獲得混合溶液二；測定混合溶液二的吸光度，即可測定GSH的含量。該方法和試劑盒靈敏度高、特異性好，操作簡單方便，成本低廉。

技術(shù)領(lǐng)域

本公開涉及基于CoOOH-TMB氧化系統(tǒng)的比色方法用于檢測谷胱甘肽，屬于生物和分析化學(xué)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對(duì)本公開的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

谷胱甘肽是一種含γ-酰胺鍵和巰基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸組成，存在于幾乎身體的每一個(gè)細(xì)胞，谷胱甘肽有還原型(GSH)和氧化型(GSSG)兩種形式，在生理?xiàng)l件下以還原型谷胱甘肽占絕大多數(shù)。谷胱甘肽能幫助保持正常的免疫系統(tǒng)功能，并具有抗氧化作用、整合解毒作用。谷胱甘肽不僅可用于藥物，更可作為功能性食品的基料，在延緩衰老、增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤等功能性食品廣泛應(yīng)用。因此，對(duì)于檢測谷胱甘肽的含量具有多方面的重要意義。

對(duì)于谷胱甘肽的檢測方法，目前比較常用的方法包括：熒光法、高效液相色譜法(HPLC)、表面增強(qiáng)拉曼光譜法(SERS)、高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)、酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法等。這些已建立的方法在定量檢測谷胱甘肽中雖然具有一定的優(yōu)勢，然而這些檢測方法需要昂貴的儀器，操作步驟繁瑣費(fèi)時(shí)，成本較高，且需要專業(yè)的人員操作。

因此，目前仍需研發(fā)更加簡便和成本低廉等的谷胱甘肽檢測試劑盒和檢測方法，以便更適合于科學(xué)研究以及日常檢測的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)以上背景技術(shù)，應(yīng)用于化學(xué)藥、生物制品、中藥和醫(yī)療器械等不同類型的創(chuàng)新產(chǎn)品，以獲得上市許可為目標(biāo)的臨床前研究、臨床試驗(yàn)的委托合同研究(CRO)。主要用于醫(yī)用檢查檢驗(yàn)儀器及服務(wù)中的體外診斷檢測，本公開提出一種基于CoOOH-TMB氧化系統(tǒng)的比色方法檢測谷胱甘肽的方法，該方法靈敏度高、特異性好，操作簡單方便，成本低廉。

具體的，本公開采用以下技術(shù)方案：

本公開的第一個(gè)目的，提供一種檢測GSH的試劑盒，該試劑盒包括：

羥基氧化鈷(CoOOH)納米片溶液或配置羥基氧化鈷(CoOOH)納米片溶液的物質(zhì)；

醋酸-醋酸鹽緩沖溶液或配制醋酸-醋酸鹽緩沖溶液的緩沖物質(zhì)；和，

四甲基聯(lián)苯胺。

本公開的第二個(gè)目的，提供一種檢測GSSG試劑盒，該試劑盒包括：

GSH掩蔽劑；

GSSG堿性還原劑；

所述GSSG堿性還原劑的中和試劑；

羥基氧化鈷(CoOOH)納米片溶液或配置羥基氧化鈷(CoOOH)納米片溶液的物質(zhì)；

醋酸-醋酸鹽緩沖溶液或配制醋酸-醋酸鹽緩沖溶液的緩沖物質(zhì)；和，

四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。

在本公開的第三個(gè)目的，提供一種檢測GSH的方法，該方法包括以下步驟：

將待測樣品與羥基氧化鈷納米片溶液混合后進(jìn)行孵育，獲得混合溶液一；

向混合溶液一中加入醋酸-醋酸鹽緩沖溶液和四甲基聯(lián)苯胺溶液，混合均勻，獲得混合溶液二；

測定混合溶液二的吸光度，即可測定GSH的含量。