[發(fā)明專利]基于CoOOH-TMB氧化系統(tǒng)的比色方法用于檢測谷胱甘肽

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010030810.7
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN111024636B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 袁玲玲;郭文娟
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇長星醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/38
• 代理公司: 佛山市智匯聚晨專利代理有限公司 44409
• 代理人: 曹麗敏

1.一種檢測GSH的方法，其特征是，該方法包括以下步驟：

制備標(biāo)準(zhǔn)曲線以及線性方程；

將待測樣品與羥基氧化鈷納米片溶液混合后進(jìn)行孵育，獲得混合溶液一；所述羥基氧化鈷納米片溶液為羥基氧化鈷納米片和聚乙二醇組成的混合溶液；所述羥基氧化鈷納米片溶液的濃度為50～150μg/mL，所述孵育溫度為40℃，孵育時間為3～5h；

向混合溶液一中加入醋酸-醋酸鹽緩沖溶液和四甲基聯(lián)苯胺溶液，混合均勻，獲得混合溶液二；所述醋酸-醋酸鹽緩沖溶液的pH為3～4；所述四甲基聯(lián)苯胺 溶液的濃度為2～8mmoL/L；

測定混合溶液二的吸光度，將混合溶液二的吸光度數(shù)據(jù)代入線性方程，即可測定GSH的含量。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，所述待測樣品是生物樣品或非生物樣品。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，所述樣品是細(xì)胞、全血、血漿或血清。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，所述羥基氧化鈷納米片的形貌為規(guī)則的或不規(guī)則的六邊形，六邊形的邊長為50～150nm。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征是，羥基氧化鈷納米片的制備方法，該方法包括以下步驟：

向Co(NO₃)₂·6H₂O溶液中加入NaOH溶液，將混合物超聲分散，然后將NaClO溶液加入到上述超聲處理過的混合物中再進(jìn)行超聲處理，獲得羥基氧化鈷納米片；

其中，所述Co(NO₃)₂·6H₂O溶液的濃度為5～15mmoL/L，NaOH溶液的濃度為0.5～1.5moL/L，NaClO溶液的濃度為0.5～1.5moL/L，加入的Co(NO₃)₂·6H₂O溶液、NaOH溶液和NaClO溶液的體積比例為400～800:100～150:10～50。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，孵育時間為4h。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，待測樣品、羥基氧化鈷納米片溶液和TMB溶液的體積比例為(300～500)：(300～500)：(50～150)。

8.一種檢測GSSG的方法，其特征是，該方法包括以下步驟：

向待測樣品中加入GSH掩蔽劑，混合均勻，得到混合溶液三；

向混合溶液三中加入GSSG堿性還原劑，混合均勻，得到混合溶液四；

向混合溶液四中加入所述GSSG堿性還原劑的中和試劑，混合均勻，得到混合溶液五；

按照權(quán)利要求1～7中任一項所述的檢測GSH的方法進(jìn)行操作，即可檢測GSSG的含量。

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征是：所述檢測GSSG的方法，還包括制備標(biāo)準(zhǔn)曲線以及線性方程的步驟。

10.一種測定GSH和GSSG比值的方法，其特征是，該方法包括以下步驟：

根據(jù)權(quán)利要求1～7中任一項所述的檢測GSH的方法測定待測樣品中的GSH的含量；

根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的檢測GSSG的方法測定待測樣品中的GSSG的含量；

計算GSH和GSSG的比值。