[發明專利]一種用于石蠟組織切片的自發熒光背景的封閉方法

在審

• 申請號: 202010030114.6
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN111024472A
• 公開（公告）日: 2020-04-17
• 發明（設計）人: 雷艷
• 申請（專利權）人: 長沙維世爾生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30;G01N1/34;G01N1/28
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 胡昌國

本發明涉及生物實驗檢測領域，提供了一種用于石蠟組織切片的自發熒光背景的封閉方法。該方法包括在室溫條件下，將石蠟組織切片浸沒在硼氫化鈉溶液中，避光孵育；孵育后的石蠟組織切片用流水清洗后再用蒸餾水清洗石蠟組織切片；在室溫條件下，將清洗處理后使石蠟組織切片浸沒在蘇丹黑溶液中，避光孵育；將孵育后的石蠟組織切片用流水清洗后再用蒸餾水清洗石蠟組織切片，可以對石蠟組織切片組織的自發熒光的熒光背景進行一個很好的削減封閉作用。經本發明中所述的自發熒光?熒光背景封閉方法處理后的石蠟組織切片，自發熒光能至少削減80%，使得特異的熒光信號在熒光顯微鏡下凸顯出來，從而使得熒光示蹤成像成功。

技術領域

本發明涉及生物實驗檢測領域,尤其涉及一種用于石蠟組織切片的自發熒光-熒光背景的封閉方法。

背景技術

免疫熒光是指用熒光抗體或者抗原，結合抗原抗體反應及熒光顯微鏡的觀測，示蹤相應抗原或抗體的一項技術。具體分為兩種，用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術，因為在實際工作中熒光抗原技術很少應用，所以人們習慣稱為熒光抗體技術，或稱為免疫熒光技術。以熒光抗體方法較常用。用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫熒光細胞（或組織）化學技術。

傳統的免疫熒光組織技術是針對冰凍組織切片進行的，冰凍切片存在組織形態不好、不易成片及樣品保存不易的缺點；而石蠟組織切片剛好能克服冰凍切片的這幾個顯著的缺點，但是石蠟組織切片由于制片過程中經過醛類試劑的固定及高溫處理等，造成樣品自發熒光顯著；若需要熒光示蹤及成像順利的話，需要對樣品自發熒光的熒光背景進行封閉，熒光的示蹤成像才能順利進行。

發明內容

本發明的目的在于針對石蠟組織切片自發熒光背景顯著，導致熒光示蹤成像很難成功（即特異熒光信號很難凸顯）的問題，提供一種用于石蠟組織切片的自發熒光-熒光背景的封閉方法。

為實現上述目的，本發明采用如下的技術方案：

一種用于石蠟組織切片的自發熒光-熒光背景的封閉方法包括如下步驟：

S1：在室溫條件下，將石蠟組織切片浸沒在硼氫化鈉溶液中，避光孵育；

S2：將所述步驟S1孵育后的石蠟組織切片用流水清洗后再用蒸餾水清洗石蠟組織切片；

S3：在室溫條件下，將所述步驟S2處理后的石蠟組織切片浸沒在蘇丹黑溶液中，避光孵育；

S4：將所述步驟S3孵育后的石蠟組織切片用流水清洗后再用蒸餾水清洗組織切片。

優選的，所述步驟S1中硼氫化鈉溶液的濃度為0.01%-1%。

優選的，所述步驟S1避光孵育的時長為30min。

優選的，所述步驟S3避光孵育的時長為5-10min。

優選的，所述步驟S2和步驟S4流水清洗的時長為15min。

優選的，所述步驟S3中蘇丹黑溶液其濃度為0.01%-1%。

和現有技術相比，本發明的有益技術效果在于:經本發明中所述的自發熒光-熒光背景的封閉方法處理后的石蠟組織切片，自發熒光能至少削減80%，使得特異的熒光信號在熒光顯微鏡下凸顯出來，從而使得熒光示蹤成像成功。

具體實施方式

為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，其中描述了實現本發明采用的實施例。應明白，還可使用其他的實施例，或者對本文所舉的實施例進行結構和功能上的修改，而不會脫離本發明的范圍和實質。

一種用于石蠟組織切片的自發熒光背景的封閉方法包括如下步驟：