[發明專利]一種胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010026469.8
• 申請日: 2020-01-10
• 公開（公告）號: CN111100190B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發明（設計）人: 劉衡;高孟婷;陳壯志;王音;李超男;巫秀美
• 申請（專利權）人: 大理大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/06;C07K1/04;A61P31/04;A61P31/10
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 呂紀濤

本發明提供了一種胡蜂毒肽反序類似物WVD?Ⅱ及其制備方法和應用，屬于涉及多肽合成技術領域所述胡蜂毒肽反序類似物WVD?Ⅱ的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。本發明的胡蜂毒肽反序類似物WVD?Ⅱ的N端帶有正電荷，能夠與帶負電的細胞膜結合，C端的疏水性氨基酸形成α螺旋結構，能夠在細胞膜表面穿孔，從而導致細菌死亡。本發明的胡蜂毒肽反序類似物WVD?Ⅱ經體外抗菌活性測定表明，其對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌及真菌均具有顯著的殺菌效果，并且有著較佳的穩定性，溶血毒性低，具有廣譜、高效和安全的特點。本發明的胡蜂毒肽反序類似物WVD?Ⅱ可以在臨床上作為活性成分替代傳統抗生素進行治療。

技術領域

本發明涉及多肽合成技術領域，尤其涉及一種胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ及其制備方法和應用。

背景技術

抗菌肽可以抵御微生物入侵，對革蘭氏陰性菌、陽性菌、真菌、病毒、腫瘤和真核生物等有專一或非專一作用。除了具有抗微生物作用，抗菌肽還有其他功能。抗菌肽多以多肽類似物或者多肽衍生物形式應用，這些物質可以通過對天然抗菌肽氨基酸的改造得到。雖然目前已發現大量的天然抗菌肽有望取代傳統抗生素的濫用所帶來的耐藥性的問題，但目前天然抗菌肽還存在著許多缺點，限制了其作為臨床藥物的應用，特別是在毒性以及酶解穩定性的方面。

發明內容

本發明的目的在于提供一種胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ及其制備方法和應用，該胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ具有較好的抑菌活性。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ，所述胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

本發明還提供了上述方案所述胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ的制備方法，包括以下步驟：

1)按照所述胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ的氨基酸序列在樹脂上順次偶聯氨基酸，得到肽樹脂；

2)對步驟1)所述肽樹脂進行裂解，加入側鏈保護基清除劑，沉淀目的多肽，離心，收集沉淀得到胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ。

優選的，步驟1)中所述樹脂包括4-(2′,4′-二甲氧基苯基-芴甲氧羰基-氨甲基)-苯氧基乙酰氨基-甲基二苯甲胺樹脂。

優選的，步驟1)中偶聯氨基酸所用的偶聯試劑選自二環己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺、N-二氨基丙基-N-乙基碳二亞胺、2-(1H-苯并三偶氮L-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯、O-苯并三唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鹽、六氟磷酸苯并三唑-1-氧基三(二甲氨基)磷、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷和1-羥基苯并三唑中的一種或幾種。

優選的，步驟2)中裂解所用的裂解液包括三氟乙酸和/或氫氟酸。

優選的，步驟2)中所述肽樹脂的質量和裂解液的體積的比例為1g:10～50mL。

優選的，步驟2)中所述側鏈保護基清除劑選自茴香硫醚、苯甲硫醚、三異丙基硅烷、苯酚、水、1,2-乙二硫醇和間甲酚中任意兩種或者兩種以上的組合。

優選的，步驟2)中所述沉淀目的多肽的試劑包括冰無水乙醚。

優選的，在步驟2)得到胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ后，還包括對胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ進行純化。

本發明還提供了上述方案所述胡蜂毒肽反序類似物WVD-Ⅱ在廣譜抑菌中的應用。