[發(fā)明專利]一種快速提取細胞RNA的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010020488.X
• 申請日: 2020-01-09
• 公開（公告）號: CN111004799A
• 公開（公告）日: 2020-04-14
• 發(fā)明（設計）人: 謝嚴
• 申請（專利權）人: 上海奕杉生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京中索知識產權代理有限公司 11640
• 代理人: 趙登陽

本發(fā)明公開了一種快速提取細胞RNA的方法，包括以下步驟：收集細胞，加入裂解液；混勻，并吸取混勻后的液體，轉移至吸附柱中；離心；加入清洗液，離心；加入洗脫液至吸附柱內的膜上，離心；收集離心后的洗脫液。本發(fā)明操作簡單,不需要特殊的設備，經濟實用，可以節(jié)約時間和試劑，免除有機溶劑對人體的損害，可以使得抽提時間縮短至8分鐘內，提取出的RNA純度高。

技術領域

本發(fā)明涉及分子生物學技術領域，尤其涉及一種快速提取細胞RNA的方法。

背景技術

RNA是以DNA的一條鏈為模板，以堿基互補配對原則，轉錄而形成的一條單鏈，主要功能是實現(xiàn)遺傳信息在蛋白質上的表達，是遺傳信息向表型轉化過程中的橋梁。在此過程中，轉運RNA(Transfer RNA,tRNA)是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應的氨基酸殘基與正在進行翻譯的mRNA結合，而后核糖體RNA(Ribosomal RNA,rRNA)將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進而構成蛋白質分子。RNA由核糖核苷酸經磷酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構成。RNA是分子生物學研究的一個重要組成部分,RNA表達的檢測,無論是用Northern blot還是用RT-PCR都要進行RNA的提取。傳統(tǒng)的RNA提取方法步驟繁瑣,提取時間較長。

發(fā)明內容

基于背景技術存在的技術問題，本發(fā)明提出了一種快速提取細胞RNA的方法。

本發(fā)明提出的一種快速提取細胞RNA的方法，包括以下步驟：

S1：收集細胞，加入裂解液；

S2：混勻，并吸取混勻后的液體，轉移至吸附柱中；

S3：離心；

S4：加入清洗液，離心；

S5：加入洗脫液至吸附柱內的膜上，離心；

S6：收集離心后的洗脫液。

優(yōu)選地，所述S1中的裂解液為異硫氰酸胍溶液、N-月桂酰肌氨酸鈉、Tween-20和Triton X-100中的一種或多種。

優(yōu)選地，所述S4中的清洗液為異硫氰酸胍溶液、氯化鈉溶液和無水酒精中的一種或多種。

優(yōu)選地，所述S6中的洗脫液為無RAN酶去離子水。

優(yōu)選地，所述異硫氰酸胍溶液的濃度為0.5mol/L-8mol/L，所述N-月桂酰肌氨酸鈉為0.1％-1％，所述Tween-20為0.5％-2％，所述Triton X-100為0.5％-2％。

優(yōu)選地，所述異硫氰酸胍溶液的濃度為0.1mol/L-0.6mol/L，所述氯化鈉溶液為50mmol/L-200mmol/L，所述無水酒精所占比例為80％。

優(yōu)選地，所述異硫氰酸胍溶液的濃度為4mol/L，所述N-月桂酰肌氨酸鈉為0.5％，所述Tween-20為1％，所述Triton X-100為1％。

優(yōu)選地，所述異硫氰酸胍溶液的濃度為0.3mol/L，所述氯化鈉溶液為100mmol/L，所述無水酒精所占比例為80％。

優(yōu)選地，所述洗脫液為去離子水與1％的DEPC原液混勻6小時后，高壓除菌配置而成的無RAN酶去離子水。

優(yōu)選地，所述S6中，用離心管收集離心后的洗脫液。

本發(fā)明中的有益效果為：

1.操作簡單,不需要特殊的設備，經濟實用，提取過程中不使用有機溶劑,可以節(jié)約時間和試劑，免除有機溶劑對人體的損害，減少污染,更加環(huán)保。

2.可以使得抽提時間縮短至8分鐘內，并且不存在DNA污染，提取過程易于自動化，提取出的RNA純度高。

附圖說明