[發(fā)明專利]一種快速提取細(xì)胞RNA的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010020488.X | 申請日: | 2020-01-09 |
| 公開(公告)號: | CN111004799A | 公開(公告)日: | 2020-04-14 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 謝嚴(yán) | 申請(專利權(quán))人: | 上海奕杉生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京中索知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11640 | 代理人: | 趙登陽 |
| 地址: | 201400 上海市奉賢區(qū)滬*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 快速 提取 細(xì)胞 rna 方法 | ||
1.一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,包括以下步驟:
S1:收集細(xì)胞,加入裂解液;
S2:混勻,并吸取混勻后的液體,轉(zhuǎn)移至吸附柱中;
S3:離心;
S4:加入清洗液,離心;
S5:加入洗脫液至吸附柱內(nèi)的膜上,離心;
S6:收集離心后的洗脫液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述S1中的裂解液為異硫氰酸胍溶液、N-月桂酰肌氨酸鈉、Tween-20和Triton X-100中的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述S4中的清洗液為異硫氰酸胍溶液、氯化鈉溶液和無水酒精中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述S6中的洗脫液為無RAN酶去離子水。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述異硫氰酸胍溶液的濃度為0.5mol/L-8mol/L,所述N-月桂酰肌氨酸鈉為0.1%-1%,所述Tween-20為0.5%-2%,所述Triton X-100為0.5%-2%。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述異硫氰酸胍溶液的濃度為0.1mol/L-0.6mol/L,所述氯化鈉溶液為50mmol/L-200mmol/L,所述無水酒精所占比例為80%。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述異硫氰酸胍溶液的濃度為4mol/L,所述N-月桂酰肌氨酸鈉為0.5%,所述Tween-20為1%,所述TritonX-100為1%。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述異硫氰酸胍溶液的濃度為0.3mol/L,所述氯化鈉溶液為100mmol/L,所述無水酒精所占比例為80%。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述洗脫液為去離子水與1%的DEPC原液混勻6小時后,高壓除菌配置而成的無RAN酶去離子水。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速提取細(xì)胞RNA的方法,其特征在于,所述S6中,用離心管收集離心后的洗脫液。
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