[發明專利]臍帶間充質干細胞的三維培養方法有效
| 申請號: | 202010018006.7 | 申請日: | 2020-01-08 |
| 公開(公告)號: | CN111139220B | 公開(公告)日: | 2022-04-12 |
| 發明(設計)人: | 胡士庶;宋蕓娟;劉露林;沈潔;沈艷 | 申請(專利權)人: | 深圳市曠逸生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/0775 | 分類號: | C12N5/0775 |
| 代理公司: | 華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人: | 單驍越 |
| 地址: | 518051 廣東省深圳市*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 臍帶 間充質 干細胞 三維 培養 方法 | ||
1.一種臍帶間充質干細胞的三維培養方法,其特征在于,包括以下步驟:
將臍帶間充質干細胞接種于細胞培養器中后,將接種在所述細胞培養器中的臍帶間充質干細胞在37℃、20rpm~40rpm條件下水平旋轉孵育;及
將孵育后的臍帶間充質干細胞在450rmp~550rmp的轉速下離心2.5min~3.5min,然后在水平轉速為20rpm~40rpm條件下旋轉培養所述臍帶間充質干細胞,其中,所述細胞培養器為U型細胞板,所述細胞培養器的底部的內表面經抗細胞貼附處理。
2.根據權利要求1所述的臍帶間充質干細胞的三維培養方法,其特征在于,所述旋轉培養的水平轉速為30rpm。
3.根據權利要求1所述的臍帶間充質干細胞的三維培養方法,其特征在于,培養所述臍帶間充質干細胞的培養基為以Ultroser G替代血清的干細胞培養基。
4.根據權利要求3所述的臍帶間充質干細胞的三維培養方法,其特征在于,所述干細胞培養基中Ultroser G的質量百分含量為1.5%~2.5%。
5.根據權利要求1所述的臍帶間充質干細胞的三維培養方法,其特征在于,所述將臍帶間充質干細胞接種于細胞培養器中的步驟中,接種密度為50個/μL~80個/μL。
6.根據權利要求1所述的臍帶間充質干細胞的三維培養方法,其特征在于,所述孵育的時間為1h。
7.根據權利要求1所述的臍帶間充質干細胞的三維培養方法,其特征在于,還包括以臍帶為原料制備臍帶間充質干細胞的步驟。
8.根據權利要求7所述的臍帶間充質干細胞的三維培養方法,其特征在于,所述以臍帶為原料制備臍帶間充質干細胞的步驟包括:
將臍帶剪切為2cm~3cm組織塊,去除臍動脈和臍靜脈,剝離臍帶膠質,接著將剝離臍帶膠質的組織塊剪碎成1mm3~3mm3的組織塊后,加入無血清間充質干細胞完全培養基培養,得到臍帶間充質干細胞。
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