[發(fā)明專利]高濃啤酒菌種及其篩選方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010014507.8
• 申請日: 2020-01-07
• 公開（公告）號: CN111154662B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發(fā)明（設計）人: 陳君;王陪武;熊丹;劉奮強;羅娜;黃蓋中;陳穗新;林盛恒;陳俊芳
• 申請（專利權）人: 廣州南沙珠江啤酒有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N1/36;C12N1/02;C12C12/00;C12R1/645
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 李德魁;李海恬

1.一種高濃啤酒菌種的篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：

活化：挑取出發(fā)菌株，接入18°P麥汁中25℃培養(yǎng)24h；

馴化：將拉格酵母作為出發(fā)菌種接入含預定氨基酸的復合培養(yǎng)基中進行馴化，保持溫度為15℃，馴化5次，所述復合培養(yǎng)基的糖度為30°P；所述預定氨基酸為：80mg/L天冬氨酸，50mg/L谷氨酸，110mg/L天冬酰胺，80mg/L絲氨酸，10mg/L谷氨酰胺，90mg/L組氨酸，60mg/L甘氨酸，70mg/L蘇氨酸，120mg/L丙氨酸，150mg/L精氨酸，110mg/L酪氨酸，140mg/L纈氨酸，40mg/L蛋氨酸，80mg/L異亮氨酸，70mg/L色氨酸，195mg/L苯丙氨酸，170mg/L亮氨酸，110mg/L賴氨酸，10mg/L半胱氨酸，360mg/L脯氨酸；所述復合培養(yǎng)基中還包括復合糖份，所述復合糖份為：21.5-25.6g/L葡萄糖，2.9-3.8g/L果糖，12.1-14.5g/L蔗糖，172.7-180.5g/L麥芽糖，41.8-46.9g/L麥芽糖三糖，52.3-56.7g/L麥芽糖四糖；

分離：將最后一次馴化得到的培養(yǎng)液接入18°P麥汁中25℃培養(yǎng)24h進行活化，再將活化好菌液倒入無酒精添加的復合培養(yǎng)基中，15℃下發(fā)酵培養(yǎng)，并檢測酵母死亡率和酒精度，選用符合預定標準的酵母作為預定分離酵母；將上述選定的預定分離酵母的菌落涂布在糖度為25-30°P的復合培養(yǎng)基平板中劃線培養(yǎng)分離，找出單菌落進行單菌落分離，挑取生長良好的菌落接種至麥汁液體中進行活化，采用梯度稀釋法分離得到單菌落；

篩選：將上述分離得到的單菌落接種于18°P麥汁中，12℃培養(yǎng)，待麥汁糖度降至12°P時，加入8％酒精，15℃培養(yǎng)，選擇其中耐高酒精濃度的菌株，即得。

2.根據(jù)權利要求1所述的高濃啤酒菌種的篩選方法，其特征在于，所述篩選步驟之后還包括評價步驟，所述評價步驟中，將篩選得到的耐高酒精濃度的菌株進行小試試驗，評價其生產(chǎn)適應性。