[發明專利]檢測新城疫病毒的引物和探針組合以及試劑盒和檢測方法在審
| 申請號： | 202010013561.0 | 申請日： | 2020-01-07 |
| 公開（公告）號： | CN111118212A | 公開（公告）日： | 2020-05-08 |
| 發明（設計）人： | 王春光;王文靜;張鐵;翟向和;李希明;曹立輝;白云;徐瑞濤 | 申請（專利權）人： | 河北農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 石家莊國為知識產權事務所 13120 | 代理人： | 陳曉彥 |
| 地址： | 071000 河北省保定市樂凱*** | 國省代碼： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 新城 疫病 引物 探針 組合 以及 試劑盒 方法 | ||
1.用于檢測新城疫病毒的引物和探針組合，其特征在于，所述引物的序列為：
上游引物：5′-ACGTCTTTATTACTCCTGAGCTTGTCATTGTGA-3′；
下游引物：5′-TGATTACCTAAGTCCTTTGCCAGAGCATCTACT-3′；
所述探針的序列為：5′-AAGTTCACATGCCTCACCCAGGAACTTGTA-THF-TGATGTATGCGGATA-3′。
2.一種檢測新城疫病毒的試劑盒，其特征在于，包含權利要求1所述引物和探針組合。
3.根據權利要求2所述的檢測新城疫病毒的試劑盒，其特征在于，所述探針5′端以熒光基團修飾，所述下游引物的5′端以生物素修飾。
4.根據權利要求3所述的檢測新城疫病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括熒光基礎緩沖液和乙酸鎂。
5.根據權利要求4所述的檢測新城疫病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括膠體金側向流免疫層析試紙條。
6.一種檢測新城疫病毒的方法，其特征在于，具體操作為：提取待測物的基因組，用權利要求5所述試劑盒進行重組酶介導等溫核酸擴增，擴增完成后用所述膠體金側向流免疫層析試紙條檢測擴增產物。
7.根據權利要求6所述的檢測新城疫病毒的方法，其特征在于，所述重組酶介導等溫擴增的反應體系為：
反應溫度為37～39℃，反應時間23～40min。
8.根據權利要求7所述的檢測新城疫病毒的方法，其特征在于，所述反應時間為23～25min。
9.根據權利要求7所述的檢測新城疫病毒的方法，其特征在于，用所述膠體金側向流免疫層析試紙條進行擴增產物檢測。
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