[發(fā)明專利]血漿型凍干粉兒茶酚胺類物質及代謝物的質量控制物質制備和應用

在審

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• 申請日: 2020-01-07
• 公開（公告）號: CN111208220A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發(fā)明（設計）人: 鄒繼華;沈敏;古詠梅;楊曉東;李全樂;屠敏敏;鄒炳德
• 申請（專利權）人: 美康生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 寧波市鄞州甬致專利代理事務所(普通合伙) 33228
• 代理人: 沈春紅

一種血漿型凍干粉兒茶酚胺類物質及代謝物的質量控制物質制備和應用，該物質由如下主要步驟制備而得：搜集臨床新鮮無血漿進行傳染病篩查，選擇篩查結果為陰性的樣本，混合在一起備用；將血漿采用活性炭吸附其中的兒茶酚胺類物質及代謝物，得空白血漿；空白血漿中添加兒茶酚胺類物質及其代謝物質的標準儲備溶液，攪拌至均勻；向血漿中加入穩(wěn)定劑、賦形劑、抗氧劑、防腐劑攪拌至完全溶解；獲得的血漿根據規(guī)格要求用安瓿瓶進行分裝、冷凍干燥制備成凍干粉。能克服新鮮血漿、冷凍血漿兒茶酚胺類物質及代謝物質量控制物質不穩(wěn)定、不易長時間保存的缺點，具有均勻性、穩(wěn)定性良好的優(yōu)點。

技術領域

本發(fā)明涉及醫(yī)學檢驗技術領域，具體涉及一種血漿型凍干粉兒茶酚胺類物質及其代謝物的質量控制物質制備和應用。

背景技術

兒茶酚胺類物質(CAs)是人類中樞神經重要的信息傳遞物質，參與、維持和調節(jié)神經系統，是生物體內具有較強生理學活性的內源性物質，由腎上腺髓質、腎上腺神經元以及腎上腺外嗜鉻體合成與分泌的單胺類神經遞質，在大腦和神經信號傳導中起著重要的作用。兒茶酚胺類物質主要包括去甲腎上腺素(Norepinephrine，NE)、腎上腺素(Epinephrine，E)、異丙腎上腺素和多巴胺(Dopamine，DA)。

兒茶酚胺類物質的化學結構中帶有一個雙羥基苯環(huán)和一個帶氨基的側鏈，極性較大，易溶于水，其中的鄰苯二酚結構在酸性條件下比較穩(wěn)定，中性或堿性條件下易被氧化成醌。生物樣品中兒茶酚胺含量極微，其特殊的化學結構導致易被氧化，穩(wěn)定性較差。腎上腺素(E)及去甲腎上腺素(NE)經兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)的作用下生成變腎上腺素(MN)和去甲基變腎上腺素(NMN)，腎上腺素(E)和去甲腎上腺素(NE)最終轉化為3-甲氧-4-羥基苦杏仁酸(香草扁桃酸，VMA)，VMA是E和NE的主要代謝終產物，并以較高濃度出現在血漿和尿液中。

臨床檢測患者樣本中的CAs用于嗜鉻細胞瘤、副神經節(jié)瘤、神經母細胞瘤、高血壓、心肌梗塞、腎上腺髓質增生等疾病的診斷和治療，同時有助于診斷甲狀腺功能異常、充血性心力衰竭、糖尿病、腎臟功能不全等疾病，具有重要的臨床意義。由于MNs(MN和NMN的總稱)半衰期比CAs長，受藥物影響較小等特性，其診斷嗜鉻細胞瘤的敏感性要高于CAs，有研究表明尿總MNs對嗜鉻細胞瘤的敏感性為94.7％，高于尿CA和VMA，后兩者的敏感性分別為80％和60％。由于在不同腫瘤發(fā)病階段，CAs代謝有快有慢，進入血、尿中的濃度也會有所不同，所以臨床上同時測定尿、血中的CAs及其代謝產物MNs來獲得更高的診斷率。

目前用于檢測CAs及MNs的方法主要有：免疫法、化學發(fā)光法、毛細管電泳法(CE)、熒光光度法(FL)、高效液相色譜電化學檢測法(HPLC-ECD)、氣相色譜串聯質譜法(GC-MS)、液相色譜串聯二級質譜法(HPLC-MS/MS)法。不同的檢測方法因檢測原理不同，在檢測靈敏度、檢測項目種類上也有很大區(qū)別，導致了其在臨床上的不同應用范圍。

HPLC-MS/MS法可同時測定CAs及其代謝物，重現性好，可在線分析，逐漸成為臨床檢測CAs及其代謝物的發(fā)展趨勢。

在臨床上常采用EDTA-K₂或肝素、檸檬酸抗凝血漿或尿作為臨床檢測CAs及其代謝物的樣本。兒茶酚胺類物質及其代謝物的準確測量需要一個穩(wěn)定質量控制物質來校準、監(jiān)控儀器狀態(tài)和試劑的好壞，目前國內尚無兒茶酚胺類物質及其代謝物的質量控制物質制備方法的專利相關報道信息。國內美康生物發(fā)明的“用于準確測定體液樣本中兒茶酚胺和變腎上腺素的質譜試劑盒”專利中有包含質控品1、2，但該專利未涉及到質控品的相關制備方法信息。

在臨床檢測CAs及其代謝物時由于檢測樣本為血漿，如果質量控制物質的基質與待測樣本相同或相似，就可以更好的監(jiān)測實驗方法的準確性和穩(wěn)定性。雖然可以直接使用血漿作為質量控制物質用于臨床監(jiān)測，但由于血漿為液體，臨床實驗室缺少超低溫保存裝置，導致其不宜長久保存。

發(fā)明內容