[發明專利]一種開放式生產木霉固體菌種的方法

有效

• 申請號: 202010003546.8
• 申請日: 2020-01-03
• 公開（公告）號: CN110982711B
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 黃啟為;沈其榮;陽芳;梅慧玲;李靜
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N11/02;C12R1/885
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

本發明公開了一種開放式生產木霉固體菌種的方法。該方法包括向粉狀植物源材料中加入全價氨基酸稀釋液，充分混勻，調節混合物pH值至1.0～1.8，靜置10～12小時，待pH穩定后向其中接種貴州木霉NJAU4742發酵液，充分混勻后將其置于底部布滿小孔的淺盤或透氣性膜上，布料厚度2～4cm，再將已布料的淺盤或膜置于盤架內，保持發酵空間溫度28～30℃，濕度75～90％RH，讓其發酵3～5天，即可獲得木霉固體菌種。在發酵物料和工廠化的生產空間均無需滅菌條件下開放式生產木霉固體菌種，產品菌種數量高，雜菌率不到10％，遠遠低于農用微生物菌劑標準中雜菌率，生產成本為傳統木霉固體發酵技術的1/5。

技術領域

本發明屬于微生物發酵領域，涉及一種開放式生產木霉固體菌種的方法。

背景技術

培肥土壤地力特別是土壤生物地力，是現代農業可持續發展面臨的一個重要關鍵共性技術問題。現代農業生產中，施用有機肥、生物有機肥料和微生物制劑是培肥土壤地力的有效措施之一。

在土壤培肥中，當前微生物肥料或制劑產品一般以芽孢桿菌類作為功能微生物，普遍存在田間試驗效果不穩定、菌種構成單一、功能菌株根際競爭力較弱等問題的困擾。

木霉具有生物量大、根表定殖能力強、次生代謝產物種類多和含量高、促生和生防效果顯著的特點，在許多方面顯示出比芽孢桿菌更好的效果。但木霉菌種在液體擴繁中不能有效產孢，且現有的固體擴繁工藝需要對發酵物料和生產空間進行嚴格滅菌，生產成本和市場價格較高，推廣應用困難，成為制約木霉真菌固體菌種生產和推廣的技術瓶頸。

發明人團隊前期申請了一項中國專利CN105586279B，公開了一種木霉直接發酵作物秸稈制備木霉固體菌種的方法及制備的產品。該方法包括包括向作物秸稈中加入氨基酸稀釋液后調節起始pH為3.0-4.0，陳化后接種木霉液體菌種進行固體發酵獲得木霉固體菌種；其中發酵室內溫度為30±2℃，室內空氣濕度65％±5％。按照該方法在200g作物秸稈與40ml氨基酸水解液混配后發酵9天，木霉含量可達到5.9×10⁹個/g。但是CN105586279B的方法為實驗室小試的方法，其固體發酵是在塑料飯盒中將秸稈加入木霉發酵液和氨基酸液后置于培養箱培養，整個環境比較小且密閉，當把發酵量放大以后，發現保持專利中的條件雜菌含量驟然升高，終產品無法達到10⁹個/g數量級。而木霉固體菌種要走向產業化必然要進行放大化生產。因此，急需開發一種適用于工業化大生產的無需進行環境滅種的開放式生產木霉固體菌種的方法。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的上述不足，提供一種開放式生產木霉固體菌種的方法。

本發明的目的可通過以下技術方案實現：

一種開放式生產木霉固體菌種的方法，向粉狀植物源材料中加入全價氨基酸稀釋液，充分混勻，調節混合物pH值至1.0～1.8，靜置10～12小時，待pH穩定后向其中接種保藏號為CGMCC NO.12166的貴州木霉NJAU4742發酵液，充分混勻后將其置于底部布滿小孔的淺盤或透氣性膜上，布料厚度2～4cm，再將已布料的淺盤或膜置于盤架內，保持發酵空間溫度28～30℃，濕度75～90％RH，讓其發酵3～5天，即可獲得木霉固體菌種；所述的粉狀植物源材料選自作物秸稈或菇渣粉中的任意一種或多種。

作為本發明的一種優選，所述的全價氨基酸稀釋液的稀釋比例為10倍～20倍稀釋，全價氨基酸稀釋液與粉狀植物源材料的體積質量比(升/公斤)為1.8～2.5：1。