[發(fā)明專利]一種開放式生產(chǎn)木霉固體菌種的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010003546.8
• 申請日: 2020-01-03
• 公開（公告）號: CN110982711B
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設計）人: 黃啟為;沈其榮;陽芳;梅慧玲;李靜
• 申請（專利權）人: 南京農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N11/02;C12R1/885
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

1.一種開放式生產(chǎn)木霉固體菌種的方法，其特征在于向粉狀植物源材料中加入全價氨基酸稀釋液，充分混勻，調(diào)節(jié)混合物pH值至1.0~1.8，靜置10~12小時，待pH穩(wěn)定后向其中接種保藏號為CGMCC NO.12166的貴州木霉NJAU4742發(fā)酵液，充分混勻后將其置于底部布滿小孔的淺盤或透氣性膜上，布料厚度2~4cm，再將已布料的淺盤或膜置于盤架內(nèi)，無需滅菌條件下，保持發(fā)酵空間溫度28~30℃，濕度75~90 %RH，讓其發(fā)酵3~5天，即可獲得木霉固體菌種；所述的粉狀植物源材料選自作物秸稈或菇渣粉中的任意一種或多種；當全價氨基酸溶液的稀釋倍數(shù)為10倍時，木霉菌株NJAU4742適宜生長產(chǎn)孢的初始pH值為1.3~1.8；當全價氨基酸溶液的稀釋倍數(shù)為20倍時，木霉菌株NJAU4742適宜生長產(chǎn)孢的初始pH值為1.0~1.6；調(diào)節(jié)混合物pH值的物質(zhì)為濃硫酸或氫氧化鉀；所述的全價氨基酸按照以下方法制備而成：(1)在密閉容器中先將病死畜禽動物經(jīng)自動化粉碎、所有固形物和液體自動轉入密閉的水解罐后，在初始酸濃度c(1/2H₂SO₄)為2.5-5mol L^-1、80-100℃和1-2個大氣壓下水解2-5小時；(2)水解結束待水解罐內(nèi)溶液冷卻至80℃以下時，靜置分層，收集中層的氨基酸溶液即得；氨基酸水解液含氨基酸和各種肽類物質(zhì)共10％及以上；含17種氨基酸、小肽和少量多肽，溶液呈強酸性，其游離氨基酸含量≥100g·L^-1。

2.根據(jù)權利要求1所述的開放式生產(chǎn)木霉固體菌種的方法，其特征在于當全價氨基酸溶液稀釋20倍時，木霉菌株NJAU4742適宜生長產(chǎn)孢的初始pH值為1.2~1.4。

3.根據(jù)權利要求1所述的開放式生產(chǎn)木霉固體菌種的方法，其特征在于所述的粉狀植物源材料由含水量不超過10%的植物源材料粉粹而成，細度為3-4mm。

4.根據(jù)權利要求1所述的開放式生產(chǎn)木霉固體菌種的方法，其特征在于所述的作物秸稈選自玉米秸稈、水稻秸稈、小麥秸稈、甜葉菊秸稈。

5.根據(jù)權利要求1所述的開放式生產(chǎn)木霉固體菌種的方法，其特征在于所述的NJAU4742發(fā)酵液中有效菌數(shù)量達到10⁸ CFU·mL^-1，NJAU4742發(fā)酵液的添加量為粉狀植物源材料質(zhì)量的5%~15%。