[發明專利]用于制備保元湯的組合物，保元湯制品，及其指紋圖譜測定和質量檢測方法

有效

• 申請號: 202010003443.1
• 申請日: 2020-01-02
• 公開（公告）號: CN113063885B
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發明（設計）人: 關斌;許舒瑜;陽麗華;肖惠琳;許玉珍;陳曉琳;南淑華;曾智發;鄭珊珊
• 申請（專利權）人: 廈門中藥廠有限公司
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86;A61K36/9068;A61P1/14
• 代理公司: 北京金信知識產權代理有限公司 11225
• 代理人: 徐琳;嚴彩霞

1.一種保元湯提取物的HPLC指紋圖譜的測定方法，包括如下步驟：

1)供試品溶液的制備：取不同批次的保元湯提取物稱定，置具塞錐形瓶中，加入甲醇、50％甲醇或50％乙醇，稱定重量，進行加熱回流，超聲處理或振搖提取處理，再稱定重量，分別用甲醇、50％甲醇或50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液，回收溶劑至干，殘渣加水使溶解，用水飽和正丁醇振搖提取2-10次，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌，棄去氨試液，正丁醇液回收溶劑至干，殘渣加甲醇適量使溶解，轉移至量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過；

2)混合對照品溶液的制備：將異甘草苷芹糖、異甘草苷、芒柄花苷、毛蕊異黃酮、人參皂苷Rg₁、人參皂苷Re、芒柄花素、人參皂苷Rb₁和人參皂苷Rd加甲醇制成參照溶液；

3)色譜條件：

流動相：乙腈A-水B，梯度洗脫，0-20min?16-17％A，20-35min?17-19.5％A，35-55min19.5-26％A，55-75min?26-29％A，75-110min?29-42％A；流速1.0ml/min；柱溫：35℃；色譜柱：Thermo?BDS?HYPERSIL?C18?250×4.6mm，5μm；檢測波長：203nm；

4)測定：

吸取參照溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，分別得到供試樣品溶液和混合對照品溶液的液相色譜；

5)采用國家藥典委員會制定的中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統軟件，對供試樣品溶液和混合對照品溶液的液相色譜進行數據匹配，得標準指紋圖譜，

其中，所述保元湯提取物通過包括以下步驟的制備方法得到：將人參3.73重量份、黃芪7.46重量份、甘草1.87重量份、肉桂0.75重量份，加生姜3.00重量份，煎煮兩次，一煎加水，浸泡30-60分鐘后，煮沸，煎煮45-60分鐘，趁熱過濾，得一煎藥液，二煎加水，煮沸，煎煮35-50分鐘，趁熱過濾，得二煎藥液，合并兩次藥液，減壓濃縮得到保元湯提取物。

2.根據權利要求1所述的測定方法，其中，所述供試品溶液的制備包括：取不同批次的保元湯提取物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇、50％甲醇或50％乙醇50-200ml，稱定重量，進行加熱回流2-3h、超聲處理10-30分鐘或振搖3-4h，再稱定重量，分別用甲醇、50％甲醇或50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液40ml，回收溶劑至干，殘渣加水15ml使溶解，用水飽和正丁醇振搖提取3-5次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨試液15ml洗滌，棄去氨試液，正丁醇液回收溶劑至干，殘渣加甲醇適量使溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過。

3.根據權利要求1所述的測定方法，其中，所述指紋圖譜有13個特征共有峰，峰1、2來自于甘草，峰3、9、10來自于黃芪和甘草，峰4、5、8、11來自于黃芪，峰6、7、12、13來自于人參。

4.根據權利要求1至3任一項所述的測定方法，其中，所述指紋圖譜中1號峰為異甘草苷芹糖，2號峰為異甘草苷，3號峰為芒柄花苷，4號峰為毛蕊異黃酮，6號峰為人參皂苷Rg₁，7號峰為人參皂苷Re，9號峰為芒柄花素，12號峰為人參皂苷Rb₁，13號峰為人參皂苷Rd。

5.根據權利要求1所述的測定方法，其中，所述制備方法中，一煎加水的體積與人參的重量之比mL/g為600-800:3.73。

6.根據權利要求1所述的測定方法，其中，所述制備方法中，二煎加水的體積與人參的重量之比mL/g為450-650:3.73。

7.根據權利要求1所述的測定方法，其中，所述制備方法中，減壓濃縮至合并所得藥液體積的四分之一至五分之一。

8.根據權利要求1所述的測定方法，其中，所述制備方法中，減壓濃縮中，溫度≤60℃。