[發明專利]一株乙酰微小桿菌及其在防治植物寄生線蟲病上的應用

在審

• 申請號: 202010003186.1
• 申請日: 2020-01-02
• 公開（公告）號: CN110951656A
• 公開（公告）日: 2020-04-03
• 發明（設計）人: 周波;王建宇;張曉春;王冰;林榕姍;趙鵬;李根;于豐源
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/20;A01P5/00;C12R1/01
• 代理公司: 濟南竹森知識產權代理事務所(普通合伙) 37270
• 代理人: 朱家富

本發明公開了一株乙酰微小桿菌及其在防治根結線蟲病中的應用，本發明提供的乙酰微小桿菌(Exiguobacterium acetylicum)AMCC 101217，保藏編號為CGMCC No.16305；該菌可有效地防治番茄根結線蟲病，其卵囊數、根結數、蟲口密度相比于空白對照分別下降了84.69％、65.86％和73.24％；該菌同時也有效地減輕了根結線蟲病對番茄的危害，與空白對照相比，其地上部干鮮重及地下部干鮮重均差異極顯著。

技術領域

本發明涉及一株乙酰微小桿菌及其在防治植物寄生線蟲病上的應用，屬于微生物技術領域。

背景技術

植物寄生線蟲是一種常見的土傳病害，目前已成為制約世界農業發展的重要因素之一，據統計，全球每年因植物寄生線蟲病損失高達1570億美元。由于植物寄生線蟲病具有“易感染、難防治、危害大”的特點，因而又被稱為植物癌癥。

應用化學藥劑防治在當前農業生產中占據著主導地位，用于防治植物寄生線蟲的化學農藥稱為殺線劑，分為熏蒸劑和非熏蒸劑兩種，在過去的幾十年里，化學殺線劑具有經濟、速效的特點深受農民的歡迎。但是，隨著人們環保意識的加強，國家對于綠色農業和健康農業的重視，化學殺線劑因其高殘留、高毒性、高風險性等弊端，其應用正逐步受到限制。

隨著人們對根結線蟲病的重視以及研究的不斷深入，一些化學防治的取代方法不斷被發掘，生物防治作為其中之一，現已成為植物寄生線蟲防治的研究熱點。植物寄生線蟲的生物防治是指利用根結線蟲的天敵生物或是它們的代謝產物殺傷或抑制線蟲，以減輕病害的發生。生物防治因其環境友好、作用效果明顯、無殘留、使用過程對人畜安全等特點得到了研究以及產業層面的關注。目前，雖然對生防菌的研究越來越多，但是已注冊登記并實際應用到農業生產中的所占比例還很小，且菌種較為單一，其中很重要的原因就是生防菌在田間防治效果不穩定，大大限制了生物防治的發展。

發明內容

本發明針對現有技術的不足，提供一株乙酰微小桿菌可應用于植物寄生線蟲病的生物防治。

一株乙酰微小桿菌(Exiguobacterium acetylicum)AMCC 101217，簡稱AMCC101217菌株，從根際土壤中分離得到，已于2018年08月16日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No.16305。

AMCC101217菌株的主要生物學特性為：菌落形狀呈不規則圓形，邊緣不整齊，不透明，菌落顏色為橘黃色，且隨培養時間加長而加深，革蘭氏染色鏡檢觀察為陽性，細胞培養前期呈桿狀，后期呈橢圓形。

所述菌株乙酰微小桿菌(Exiguobacterium acetylicum)AMCC 101217，從根際土壤中分離得到，簡稱AMCC 101217。

上述AMCC 101217微生物菌劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)菌種活化：將乙酰微小桿菌(Exiguobacterium acetylicum)AMCC 101217接種于LB固體培養基平板上，于35-37℃培養22-27h；

(2)種子液制備：將活化好的AMCC101217接種于LB液體培養基中，于35-37℃，150-220rpm培養18-22h；

(3)種子液擴大培養：將步驟(2)中的種子液以5-8％的接種量接種到種子液擴大培養基中，所述的擴大培養基為LB液體培養基，于35-37℃，150-220rpm培養10-13h；

(4)發酵培養：將步驟(3)中擴大培養的種子液以5-8％的接種量接種到LANDY發酵培養基，35-37℃，150-220rpm培養22-27h，得到AMCC101217液體菌劑；