[發(fā)明專利]一種熊去氧膽酸的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010003134.4
• 申請日: 2020-01-02
• 公開（公告）號: CN113061637A
• 公開（公告）日: 2021-07-02
• 發(fā)明（設計）人: 張翔;董強;黃清東;袁偉;向世明;鄧治榮
• 申請（專利權）人: 四川百特芳華醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C12P33/02
• 分類號: C12P33/02;C12P33/06
• 代理公司: 成都弘毅天承知識產權代理有限公司 51230
• 代理人: 沈穎

本發(fā)明公開了一種熊去氧膽酸的制備方法，其特征在于，包括以下制備步驟：(1)膽酸在7α?羥基類固醇脫氫酶、12α?羥基類固醇脫氫酶、輔酶、輔酶再生體系、水溶液的作用下發(fā)生氧化反應得到7,12酮基?石膽酸；(2)7,12酮基?石膽酸在7β?羥基類固醇脫氫酶、輔酶、輔酶再生體系的作用下發(fā)生還原反應得到12酮基?熊去氧膽酸；(3)12酮基?熊去氧膽酸脫12位羰基得到熊去氧膽酸。本發(fā)明制備熊去氧膽酸的工藝以膽酸為起始原料，原料供應充足且成本低、適合工業(yè)化規(guī)模應用，生產流程短，工藝過程溫和安全，副反應少。

技術領域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術領域，尤其涉及一種熊去氧膽酸的制備方法。

背景技術

熊去氧膽酸簡稱UDCA，是名貴中藥熊膽主要成分,能增加膽汁酸分泌，能抑制膽固醇合成，能增加肝臟過氧化化氫酶活性，可降低肝臟和血清中三酰甘油濃度，在慢性肝臟疾病中具有免疫調節(jié)作用，因此，用于治療膽結石、膽汁淤積性肝病、脂肪肝、原發(fā)性膽汁性肝硬化、各型肝炎、中毒性肝障礙、膽囊炎、膽道炎和膽汁性消化不良、膽汁返流性胃炎、眼部疾病等。

目前，關于熊去氧膽酸的制備方法主要為：1、熊膽提取：最初中藥熊膽為割取熊膽囊制成，之后采取人工養(yǎng)殖活熊取膽，但周期長、收率低、輿論爭議大，現已被淘汰；2、合成法：目前主流工藝為從豬、雞鴨鵝膽膏中提取鵝去氧膽酸，再經化學法或酶法，氧化、還原得到熊去氧膽酸，合成路線如下：

熊去氧膽酸等藥物市場逐年增長，但全球動物飼養(yǎng)數量有限，即膽汁和鵝去氧膽酸原料數量供應十分緊張，亟待開發(fā)開發(fā)的起始物料或新工藝路線，以滿足熊去氧膽酸市場增長及需求。

在這種大環(huán)境下，逐漸興起采用膽酸替代鵝去氧膽酸為原料合成熊去氧膽酸，如專利 CN201910657023，但該專利的工藝路線長，從而導致成本高，且過程中使用危險性較高的 Raney Ni，使用臭味很大的硫醇衍生物，污染嚴重，合成路線如下：

因此，為彌補熊去氧膽酸的合成工藝的技術空白，發(fā)明人現提供一種熊去氧膽酸的制備方法以解決前面提到的相關問題。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于：提供一種熊去氧膽酸的制備方法，以膽酸為起始原料，原料供應充足且成本低、適合工業(yè)化規(guī)模應用，生產流程短，工藝過程溫和安全，副反應少。

本發(fā)明采用的技術方案如下：

為實現上述目的，本發(fā)明提供一種熊去氧膽酸的制備方法，包括以下制備步驟：

(1)膽酸在7α-羥基類固醇脫氫酶、12α-羥基類固醇脫氫酶、輔酶、輔酶再生體系、水溶液的作用下發(fā)生氧化反應得到7,12酮基-石膽酸，選擇性氧化原理如下式所示：

(2)7,12酮基-石膽酸在7β-羥基類固醇脫氫酶、輔酶、輔酶再生體系的作用下發(fā)生還原反應得到12酮基-熊去氧膽酸，選擇性還原原理如下式所示：

(3)12酮基-熊去氧膽酸脫12位羰基得到熊去氧膽酸。

優(yōu)選地，所述步驟(1)中，7α-羥基類固醇脫氫酶和12α-羥基類固醇脫氫酶同時添加，或先后添加催化反應。

優(yōu)選地，所述步驟(1)中，輔酶為NAD或NADP，輔酶再生體系為核黃素還原酶/氧氣體系或醇脫氫酶/丙酮體系或乳酸脫氫酶/丙酮酸體系。

優(yōu)選地，所述步驟(1)具體為：配置7α-羥基類固醇脫氫酶、12α-羥基類固醇脫氫酶、 NAD輔酶、核黃素以及核黃素還原酶的混合溶液，然后與膽酸水溶液混合溶解，控制pH在7.5～9.0，通入空氣或氧氣氧化反應，得到7,12酮基-石膽酸。