[發明專利]C2C12細胞在疫苗佐劑機制研究中的用途和研究分析方法

在審

• 申請號: 202010002799.3
• 申請日: 2020-01-02
• 公開（公告）號: CN111057738A
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發明（設計）人: 孫紅祥;朱麗艷
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 萬尾甜;韓介梅

本發明提供一種C2C12細胞在疫苗佐劑機制研究中的用途和研究分析方法，C2C12細胞可直接作為體外細胞模型用于研究疫苗佐劑的作用機制。對于待研究的疫苗佐劑，尤其是針對桔梗皂苷D，可體外刺激C2C12細胞與肌內注射小鼠股四頭肌，分析二者在表觀和基因表達譜特征方面的一致性，研究疫苗佐劑作用的機制。本發明運用該細胞模型，通過芯片檢測數據分析，揭示了介導桔梗皂苷D佐劑作用的關鍵分子caspase?1。C2C12細胞價廉易得、培養方法簡單、成本低，重復性好，能模擬臨床上疫苗免疫接種使用實際情況，體內外研究結果一致性高，為疫苗佐劑作用機制研究提供更具臨床意義的細胞模型。

技術領域

本發明涉及一種C2C12細胞在疫苗佐劑機制研究中的用途和研究分析方法。

背景技術

疫苗接種是預防和控制傳染性疾病最經濟、有效的措施[Rappuoli R,HanonE.Sustainable vaccine development:a vaccine manufacturer'sperspective.Current opinion in immunology.2018,53:111–118]。佐劑是傳統疫苗和新型疫苗必不可少的組成成分，不僅影響機體對疫苗的適應性免疫應答強度，而且能針對特定病原體誘導最有效的免疫應答類型[Gutjahr A,Tiraby G,Perouzel E,Verrier B,PaulS.Triggering intracellular receptors for vaccine adjuvantation.Trends inimmunology.2016,37(9):573–587；Ciabattini A,Pettini E,Fiorino F,Pastore G,Andersen P,Pozzi G,Medaglini D.Modulation of primary immune response bydifferent vaccine adjuvants.Frontiers in Immunology.2016,7:427]。目前研究報道的免疫佐劑種類甚多，但多由于存在毒副作用或安全隱患等不可避免的缺陷而難以實際應用[Mohanty NN,Ashokkumar D,Fayaz A,Chandrasekar S,Ramakrishnan MA.Trends inadjuvant and vaccine delivery systems.Journal of infectious diseases.2016,4:260]。當前，新型佐劑研發的窘境一定程度上歸咎于人類對佐劑作用機制缺乏了解，這也導致了佐劑開發的新靶點嚴重缺乏[Harandi AM.Systems analysis of human vaccineadjuvants.Seminars in immunology.2018,39:30–34]。

目前，對佐劑機制的研究多集中于考察其對先天性免疫細胞或適應性免疫細胞的影響。據報道，樹突狀細胞(DC)[Welsby I,Detienne S,N'kuli F,et al.Welsby,I.etal.Lysosome-dependent activation of human dendritic cells by the vaccineadjuvant QS-21.Frontiers in Immunology.2016,7:663]或T細胞[Cibulski S P,Rivera-Patron M,Mourglia-Ettlin G,et al.Cibulski,S.P.et al.Quillajabrasiliensis saponin-based nanoparticulate adjuvants are capable oftriggering early immune responses.Scientific Reports.2018,8(1):13582]等激活在皂苷類佐劑(saponin-based adjuvants,SBAs)誘導的先天性和適應性免疫反應中具有重要作用。

先天性免疫細胞或適應性免疫細胞體外培養相對不易，且以其為體外模型獲得的佐劑機制研究結果未能在體內實驗中得到良好驗證，缺乏一致性。