[發明專利]C2C12細胞在疫苗佐劑機制研究中的用途和研究分析方法在審
| 申請號： | 202010002799.3 | 申請日： | 2020-01-02 |
| 公開（公告）號： | CN111057738A | 公開（公告）日： | 2020-04-24 |
| 發明（設計）人： | 孫紅祥;朱麗艷 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | C12Q1/02 | 分類號： | C12Q1/02 |
| 代理公司： | 杭州求是專利事務所有限公司 33200 | 代理人： | 萬尾甜;韓介梅 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | c2c12 細胞 疫苗 佐劑 機制 研究 中的 用途 分析 方法 | ||
1.C2C12細胞在疫苗佐劑作用機制研究中的用途，其特征在于，以C2C12細胞直接作為體外細胞模型用于研究疫苗佐劑的作用機制。
2.如權利要求1所述的C2C12細胞在疫苗佐劑作用機制研究中的用途，其特征在于，所述的疫苗佐劑是皂苷佐劑。
3.如權利要求2所述的C2C12細胞在疫苗佐劑作用機制研究中的用途，其特征在于，介導皂苷佐劑作用的關鍵分子為caspase-1。
4.一種疫苗佐劑作用機制研究分析方法，其特征在于，方法為：
a.將待研究疫苗佐劑肌內注射小鼠股四頭肌與體外刺激C2C12細胞，考察表觀和基因表達譜變化；
b.運用該細胞模型驗證基因芯片檢測數據處理結果，并找到介導所研究疫苗佐劑作用的關鍵分子；
c.考察局部肌內注射上述關鍵分子抑制劑對所研究疫苗佐劑活性的影響，研究其佐劑活性依賴性。
5.根據權利要求4所述的疫苗佐劑作用機制研究分析方法，其特征在于：a中的待研究疫苗佐劑為皂苷佐劑，是中藥桔梗中提取分離制備的具有佐劑活性的桔梗皂苷D。
6.根據權利要求5所述的疫苗佐劑作用機制研究分析方法，其特征在于：a中的桔梗皂苷D肌注劑量為50μg，時間2h；體外刺激C2C12細胞濃度為25μM，時間4h。
7.根據權利要求5所述的疫苗佐劑作用機制研究分析方法，其特征在于：a中的考察基因表達譜變化所用的基因芯片為Agilent SurePrint G3 8×60K小鼠基因表達譜芯片。
8.根據權利要求5所述的疫苗佐劑作用機制研究分析方法，其特征在于：針對介導皂苷佐劑作用的關鍵分子caspase-1其抑制劑為Ac-YVAD-CMK。
9.根據權利要求5所述的疫苗佐劑作用機制研究分析方法，其特征在于：該方法中免疫所用抗原為卵清蛋白OVA。
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