[發明專利]抗MCV抗體定量檢測試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 202010002462.2
• 申請日: 2020-01-02
• 公開（公告）號: CN111077321B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 肖文峰
• 申請（專利權）人: 北京森美希克瑪生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/545
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 王闖

本發明提供一種抗MCV抗體定量檢測試劑盒及其制備方法。所述抗MCV抗體定量檢測試劑盒的制備方法包括：分別制備包被板、酶標液、系列校準品、質控品、樣本稀釋用緩沖液、底物液和洗滌液。本發明的抗MCV抗體定量檢測試劑盒的制備方法，容易操作，原料成本低，制得的抗MCV抗體定量檢測試劑盒使用方便，能夠準確定量檢測樣本中的抗MCV抗體含量，可用于類風濕性關節炎的診斷。

技術領域

本發明涉及免疫分析領域，尤其涉及一種抗MCV抗體定量檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術

類風濕性關節炎（rheumatoid?arthritis，RA）是一種異質性多病因疾病，患者約占全世界人口的0.5%～1.0%，其特點是滑膜關節的慢性炎癥導致身體殘疾，而且，關節炎癥的發展以及藥物治療可能帶來的副作用，使得類風濕性關節炎患者的死亡率上升。越來越多證據表明，對類風濕性關節炎疾病的早期干涉治療可以更有效地控制病情、減輕關節損傷、對疾病結果起到更好的預后。

類風濕性關節炎的診斷標志物主要有：類風濕因子（RF）、抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗體（AKA）、抗纖聚蛋白抗體（AFA）、抗環瓜氨酸肽（CCP）抗體、抗RA33抗體、抗Sa抗體、6-磷酸葡萄糖異構酶等。盡管CCP抗體具有良好的免疫檢測特性，但對于類風濕性關節炎活動度的分析會產生不一致的結果；此外，該指標尚未揭示抗原結構，不能用于描述受影響組織，且未涉及發病機理。

發明內容

本發明的目的首先在于提供一種抗MCV抗體定量檢測試劑盒的制備方法，容易操作，原料成本低，制得的抗MCV抗體定量檢測試劑盒能夠準確定量檢測樣本中的抗MCV抗體含量。

本發明的目的還在于提供一種抗MCV抗體定量檢測試劑盒，使用方便，能夠準確定量檢測樣本中的抗MCV抗體含量，可用于類風濕性關節炎的診斷。

為實現以上目的，本發明首先提供一種抗MCV抗體定量檢測試劑盒的制備方法，包括：分別制備包被板、酶標液、系列校準品、質控品、樣本稀釋用緩沖液、底物液和洗滌液；其中，

制備包被板的步驟包括：將含有突變型瓜氨酸波形蛋白的包被液加入微孔板條的微孔中進行包被，之后棄去孔內液體，將封閉液加入微孔板條的微孔中進行封閉，之后棄去孔內液體，對微孔板條進行干燥；

制備酶標液的步驟包括：將酶標物和酶聯抗體進行偶聯；其中，所述酶聯抗體為采用抗MCV抗體作為抗原對機體進行免疫后獲得的抗體；

制備系列校準品的步驟包括：在校準品基質液中分別加入不同濃度的抗MCV抗體，得到不同濃度的校準品，其中，所述校準品基質液為含有8wt%~12wt%體檢健康人血清的緩沖液；以緩沖液作為零點校準品；所述零點校準品選用的緩沖液與所述校準品基質液中的緩沖液相同；

制備質控品的步驟包括：在質控品基質液中加入已知濃度的抗MCV抗體，其中，所述質控品基質液為體檢健康人血清；

制備底物液的步驟包括：在緩沖液中加入所述酶標物的反應底物；

制備樣本稀釋用緩沖液的步驟包括：在緩沖液中加入表面活性劑，混合均勻；

制備洗滌液的步驟包括：在緩沖液中加入鹽與表面活性劑，混合均勻。

具體的，制備包被板的步驟中：

可選的，所述包被液為含有0.5wt%~1.5wt%突變型瓜氨酸波形蛋白的碳酸鹽緩沖液，所述碳酸鹽緩沖液的濃度為0.03mol/L~0.07mol/L，pH為8.8~11.8；

可選的，所述封閉液為含有0.8wt%~1.2wt%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩沖液，所述磷酸鹽緩沖液的濃度為0.03mol/L~0.07mol/L，pH為6.9~7.9；