[發(fā)明專利]一種肽美拉德中間體、其制備方法及用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010001942.7
• 申請(qǐng)日: 2020-01-02
• 公開（公告）號(hào): CN111073945B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 雷聲;王凱;楊乾栩;劉秀明;李源棟;蔣舉興;曲榮芬;高莉;劉娟;張翼鵬;段焰青;張玲;施楊梅;張曉鳴;于莙禾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12P21/06
• 分類號(hào): C12P21/06;C07K1/107;C11B9/02
• 代理公司: 北京市領(lǐng)專知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11590
• 代理人: 陳有業(yè)

本發(fā)明公開了一種肽美拉德中間體的制備方法，包括如下步驟：①將蛋白用蛋白內(nèi)切酶酶解，或使用蛋白內(nèi)切酶和蛋白外切酶雙酶水解得到酶解液；②得到的酶解液加入還原糖反應(yīng)經(jīng)噴霧干燥即得所述肽美拉德中間體。將得到的肽美拉德中間體用于煙草加香，卷煙的香氣量和香氣質(zhì)明顯改善。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于香料領(lǐng)域，具體涉及一種基于生物酶解調(diào)控蛋白質(zhì)水解度的方法制備的肽美拉德中間體及該中間體用于煙絲加香的用途。

背景技術(shù)

煙草行業(yè)中，在卷煙焦油量和危害性逐步降低的趨勢(shì)下，如何彌補(bǔ)卷煙香味的損失、改善卷煙的燃吸品質(zhì)成為行業(yè)對(duì)煙用香精香料研發(fā)提出的迫切要求。目前煙草加香中常用的熱反應(yīng)香精主要為完全美拉德反應(yīng)產(chǎn)物(Maillardreaction?products,MRPs)。然而，卷煙燃吸過程中煙支頭段中心溫度可達(dá)700～900℃，在這樣的高溫下，MRPs將分解失掉原有的香味，并熱解產(chǎn)生不可預(yù)測(cè)的香味物質(zhì)；且MRPs儲(chǔ)藏穩(wěn)定性差，風(fēng)味逸失，產(chǎn)品質(zhì)量很難控制。美拉德中間體化合物在常溫下無色無味，具有較穩(wěn)定的理化性質(zhì)，其在后續(xù)加熱或熱裂解條件下能繼續(xù)完成美拉德反應(yīng)，迅速釋放風(fēng)味物質(zhì)，已被證實(shí)為煙草香氣重要的貢獻(xiàn)者。因此，美拉德中間體可作為穩(wěn)定的致香前體物來改善煙草吸味，增加煙草的香味等，在卷煙加香中具有較大的應(yīng)用潛力。然而，目前美拉德中間體通用的制備方法為有機(jī)相合成法，一般在無水甲醇中回流5～8小時(shí)，然后用無水丙酮反復(fù)純化，再重結(jié)晶得到中間體；該制備方法產(chǎn)率低、制備工藝復(fù)雜、有機(jī)試劑殘留、安全性差，不便于規(guī)模化生產(chǎn)。此外，以氨基酸和還原糖為反應(yīng)底物制備的美拉德反應(yīng)中間體經(jīng)熱裂解后產(chǎn)品整體呈味單一，香韻不夠飽滿豐富，無法滿足煙草加香的需要。

針對(duì)以上現(xiàn)有技術(shù)及產(chǎn)品的缺陷提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種基于生物酶解調(diào)控蛋白質(zhì)水解度制備肽美拉德中間體煙用香料及方法。將制備的肽類美拉德中間體化合物添加至卷煙中，可以顯著提高卷煙的香氣，增強(qiáng)卷煙的吸味，圓和煙氣，烘烤香和堅(jiān)果香明顯，與卷煙煙氣香韻諧調(diào)性良好，應(yīng)用效果理想。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明第一方面公開了一種肽美拉德中間體的制備方法，包括如下步驟：

①將蛋白溶于水中，熱變性后冷卻至一定溫度，調(diào)節(jié)pH值，添加蛋白內(nèi)切酶，酶解一定時(shí)間后升溫滅酶，冷卻分離后得到酶解液；或者添加蛋白內(nèi)切酶，酶解一定時(shí)間后再添加蛋白外切酶繼續(xù)酶解一定時(shí)間后升溫滅酶，冷卻分離后得到酶解液；

②將步驟①得到的酶解液加入還原糖，調(diào)節(jié)溶液pH值進(jìn)行常壓熱反應(yīng)，然后進(jìn)行減壓真空脫水反應(yīng)，冰水浴冷卻結(jié)束反應(yīng)，經(jīng)噴霧干燥即得所述肽美拉德中間體。

優(yōu)選地，步驟①蛋白為植物蛋白，所述植物蛋白為玉米蛋白、小麥面筋蛋白、大豆蛋白、花生蛋白、葵花籽蛋白的一種；所述蛋白內(nèi)切酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶或復(fù)合蛋白酶的一種或幾種，所述的蛋白外切酶為羧肽酶、風(fēng)味酶、氨肽酶的一種或幾種。

優(yōu)選地，步驟①的蛋白與水的質(zhì)量比例為1：(8-20)，熱變性溫度為80-100℃，熱變性時(shí)間為10-60min；酶解溫度為30-60℃，酶解pH值為5-8，蛋白內(nèi)切酶和蛋白外切酶添加量分別為蛋白的0.5-5wt％，酶解時(shí)間為1-8h。

優(yōu)選地，步驟①調(diào)控玉米蛋白的水解度至4.0-5.0，調(diào)控小麥面筋蛋白的水解度至5.0-8.0，調(diào)控大豆蛋白水解度至10.0-12.0，調(diào)控花生蛋白水解度至12.0-14.0，調(diào)控葵花籽蛋白水解度至7.0-9.0；滅酶的溫度為95-100℃，滅酶時(shí)間為10-30min。

優(yōu)選地，步驟②的還原糖為木糖、葡萄糖、阿拉伯糖、果糖中的一種；所述還原糖的添加量為酶解液固形物含量的5-40wt％。

優(yōu)選地，步驟②常壓熱反應(yīng)的溫度為50-90℃且溶液pH為5-8，反應(yīng)時(shí)間為20-200min；減壓真空脫水反應(yīng)的溫度為50-90℃，反應(yīng)時(shí)間為5-60min，脫水至固形物含量10-40wt％。